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低温
- 供应商:
研卉生物
- 库存:
2
- 英文名:
COEDTAF-RO Roche 不含EDTA的cOmplete
- 规格:
20片/瓶
一般描述
由于优化了片剂的成分,它们对丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶具有出色的抑制作用,并且非常适合保护从动物组织、植物、酵母和细菌中分离的蛋白质。不含EDTA的cOmplete片剂同时含有不可逆和可逆的蛋白酶抑制剂。金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶不受抑制。
不含EDTA的cOmplete片剂与cOmplete片剂相同,唯一的区别是不包含EDTA或其他螯合剂(例如 EGTA)。
特异性
应用
- 免疫沉淀裂解缓冲液(IPLS)的组分,以裂解人胚肾细胞293(HEK293T细胞)进行谷胱甘肽共沉淀
- 射免疫沉淀测定(RIPA)缓冲液,裂解细胞进行蛋白质印迹分析
- 细菌细胞裂解缓冲液A
不含EDTA的cOmplete片剂可用于抑制较大体积(高达50 ml)中的蛋白水解活性,其中EDTA可能干扰蛋白质稳定性(例如,含金属的蛋白质)或随后的检测。由于EDTA会对IMAC(固相金属亲和色谱)产生感染,cOmplete,不含EDTA更适合用于多聚His标签融合蛋白的分离过程。
如需在更小的体积(最高达10 ml)内对蛋白酶活性进行抑制,我们推荐使用不含EDTA的cOmplete Mini。
特点和优势
- 易于使用:只需将速溶片加入到您的缓冲液中即可。
- 完善的保护:立即保护您的蛋白质免受广泛的蛋白酶的降解。
- 灵活性:几乎能够保护任何组织或细胞提取物中的蛋白质,包括动物、植物、酵母、细菌或真菌。
- 安全性:选择对您或您周围的人没有任何风险的无毒抑制剂。
组分
质量
外形
制备说明
工作溶液:制备工作溶液:
一片cOmplete无EDTA蛋白酶抑制剂片剂足以抑制50 ml提取溶液中的蛋白水解活性。当蛋白水解活性非常高时,应25ml提取缓冲液使用一片。片剂可以直接加到提取溶液中。也可制备储备溶液(25X浓度)。
制备储备溶液(25X浓度)
将一片不含EDTA的cOmplete片剂溶于2ml蒸馏水或2ml 100mM磷酸盐缓冲液(pH7.0)。
储存条件(工作溶液):储备溶液可以在2至8℃下储存1至2周,或在-15至-25℃下储存至少12周。
重悬
其他说明
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文献和实验份都稳定和无毒,能提供安全和可靠的保护,这种混和片有不含EDTA的配方,这样就更不会影响依赖金属的蛋白的活性,并可确保有效进行一些纯化工作(如应用Poly-His)标记的蛋白)。 其实重要的是这种片剂操作方便:只要将一片completeTM 加进缓冲液,便可抑制多种不同的蛋白酶,有效地保护目的蛋白,效果明显,免除了称量个别抑制剂的麻烦。一举两得,何乐而不为呢? 另外针对磷酸酶,罗氏也推出了一种PhosSTOP磷酸酶抑制剂混合片(可以与complete蛋白酶抑制剂兼容
酶活性。因此,添加蛋白酶抑制剂对于防止目的蛋白的降解从而完成免疫沉淀实验非常关键。一般主要通过添加EDTA抑制金属蛋白酶,通过Protease Cocktail(多种蛋白酶抑制剂混合物)可以抑制蛋白酶。 5. 去垢剂对于免疫沉淀实验尤其是免疫共沉淀实验是一个非常关键的因素。不同的去垢剂种类和不同的去垢剂浓度主要通过影响以下三个因素来影响免疫沉淀效果: (1)细胞质/器膜的通透性:因为许多目的蛋白都定位在细胞器中,所以必须先将这些蛋白释放出来,抗体才能与之反应。 (2) 膜蛋白的释放:许多膜蛋白
/L CaCl2、0.24 mol/L 蔗糖、0.5 mmol/L 亚精胺(Sigma)、0.15 mmol/L 精胺(Sigma)、0.02% 叠氮钠,并加入蛋白酶抑制剂混合物,见 7.2.1。 ( 3 ) 这种缓冲液能够被贮存在 4°C 条件下数月,需要防止真菌污染。蛋白酶抑制剂在使用之前方可加入,不要在准备溶剂的时候加入。 2.3 细胞核蛋白质的分离和提取 所有溶液都使用蛋白酶抑制剂。 ( 1 ) 含有膜和残留细胞骨架(图 8-1,泳道 M):第一份馏分用 NSB
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