Rosetta™ 2(DE3)pLacI Compete

如何阅读质粒图谱

由它们的天然启动子驱动。在 Rosetta （ DE3 ） pLysS 和 Rosetta （ DE3 ） pLacI 中，稀有 tRNA 基因存在于分别带有 T7 溶菌酶和 lac 阻遏基因的同一质粒上。 Tuner 菌株为 BL21 的 lacZY 缺失突变株，能够调整培养物中所有细胞的蛋白表达水平。 lac 通透酶（ lacY ）突变使得 IPTG 均匀进入群体所有细胞，从而具有浓度依赖、水平均一的诱导表达。通过调整 IPTG 浓度，表达可从极低水平调节到极强、完全诱导的表达水平（通常

很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择，现系统地解答一下，供新手借鉴。

的 tRNAs 。这样 Rosetta 菌株提供了“万能”的翻译，从而避免因大肠杆菌密码子使用频率导致的表达限制。 tRNA 基因由它们的天然启动子驱动。在 Rosetta （ DE3 ） pLysS 和 Rosetta （ DE3 ） pLacI 中，稀有 tRNA 基因存在于分别带有 T7 溶菌酶和 lac 阻遏基因的同一质粒上。 Tuner 菌株为 BL21 的 lacZY 缺失突变株，能够调整培养物中所有细胞的蛋白表达水平。 lac 通透酶（ lacY ）突变使得 IPTG 均匀进入群体

蛋白质表达的经验：如何做好原核表达

lon蛋白酶和ompT蛋白酶缺陷型的，这包 括有B834, BL21, BLR, Origami™ B, Rosetta™和Tuner™。因此在 纯化时可以保持蛋白的稳定不被降解。BL21(DE3)是应用最多的 表达的表达菌株。另外它的衍生株BLR(DE3)是recA-，RecA是大 肠杆菌中介导同源重组的重要蛋白之一。它的缺失，可以保证质 粒的稳定。 2. 保证所有细胞以同样量进行表达 Tuner™株及它的衍生株(Origami™ B和Rosetta™)是BL21菌株