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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Human Claudin-6 Protein-(Nanodisc) (His Tag & Twin strepII tag)
- 库存:
99999
- 规格:
20 μg/瓶
基因名称同义词: Claudin-6, CLDN6。
♦ 产品描述:编码人类CLDN6(P56747)Met1-Val220的DNA序列带有N端His标签和C端Twinstrep II标签。
♦ 种属: 人
♦ 序列信息: His-CLDN6-AVI-Twinstrep II
♦ 表达平台:HEK293
♦ 纯度: ≥ 90 % as determined by SDS-PAGE
♦ 内毒素: < 1.0 EU per μg protein as determined by the LAL method
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文献和实验GST融合蛋白的准备 Preparation of Glutathione-S-Transferase (GST) Fusion Proteins
- 2% of aliquot of an eluate fraction (step 26): 10 µl The GST moiety adds ~26 kD molecular mass. If protein degradation is occurring, the MW of the majority recovered species may be significantly less than the predicted MW; run the gel
行 HIS 标签的捕获。 2、HIS标签蛋白结合了,但是洗脱不充分 原因一 洗脱条件太温和。 建议 增加咪唑的浓度或选择咪唑线性梯度洗脱,或者通过降低 pH 寻找最佳洗脱条件。需要注意的是,pH 低于 3.5 容易导致镍离子脱落。 原因二 蛋白柱上沉淀。 建议 1 降低蛋白浓度。可以减少上样量,或者采用咪唑线性而非步级梯度洗脱,增加蛋白稀释度。 建议 2 试用去污剂或者改变 NaCl 的浓度,或者使用变性剂 (4-6M 盐酸胍或 4-8M 尿素) 在变性条件下洗脱。 原因三 非特异性的疏水或者其他相互
等) 可以完成一般方法很难完成的分离,如变性和非变性蛋白、功能不同的蛋白的分离 属于一种吸附层析,载量高,具有高效的捕获和浓缩作用。 基本步骤 亲和层析作为一种吸附性层析,主要步骤包括平衡、上样、清洗、洗脱和再平衡步骤 (图10)。由于亲和作用需要在特定的条件下结合和洗脱,亲和层析需要使用特定的结合缓冲液和洗脱缓冲液。 图10 亲和层析的基本步骤 适用性 带有标签的融合蛋白纯化,如His标签蛋白、GST标签蛋白等。 抗体及抗体片段的纯化 其他和某些配基有特异性结合作用的分子的纯化
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