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上海毕合生物化学技术有限公司
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科研其它ELISA
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96T
ELISA 试剂中最常见的是双抗夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)是利用已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。
小分子抗原或半抗原因仅有单个抗原表位,缺乏双抗体夹心法所需的基本条件——具有2个或2个以上表位,所以对其常用竞争法进行测定。其原理是将待检抗原和酶标抗原与相应固相抗体竞争结合,标本中抗原越多,与固相抗体结合的酶标抗原越少,与底物反应生成的颜色越浅,因此根据颜色深浅可定量测定。
关于我们:
上海毕合生物化学技术有限公司
(Shanghai Bihe Biochemical Technology Co., Ltd , 品牌: MBC)
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 大鼠红细胞山梨醇 (RBC-S)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗大鼠 RBC-S 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 RBC-S 与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠 RBC-S ,形成免疫复合
管显色适当时,即可终止酶反应。(三)洗涤洗涤在ELISA过程中不是反应聚,但却是决定实验成败的关键。洗涤的目的是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯待塑料对蛋白质的吸附作用是普遍性的。因此在ELISA测定的反应过程中应尽量避免非特异性吸附,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。在标本和结合物的稀释液和洗涤液中加入聚山梨酯(吐温,Tween)一类物质即右达到此目的。聚山梨酯是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯,为非离子型的表面
加入聚山梨酯(吐温,Tween)一类物质即右达到此目的。聚山梨酯是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯,为非离子型的表面张力物质,常作为助溶剂。根据脂肪酸的种类而对聚山梨酯编号,结合月桂酸的为聚山梨酯 20,在 ELISA 中最为常用。它的洗涤效果好,并具有减少非特异性吸附和增强抗原抗体结合的作用。 洗涤如不彻底,特别在最后一次,如有酶结合物的非特异性吸附,将使空白值升高。另外,在间接法中如血清标本内的非特异性 IgG 吸附在固相上而未被洗净,也将与酶标抗体作用而产生干扰。 ELISA 板的洗涤一般可采
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