- ￥1265
- mlBio/酶联生物
- ml2785
- 国内
- 2026年02月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
85
- 英文名：
谷氨酸脱氢酶GDH测试盒
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件：
避光 , 低温保存
- 规格：
100管/96样
微量法
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
测定意义：
GDH（EC 1.4.1.2）广泛分布于植物中，和谷氨酸合成酶（GOGAT）共同参与谷氨酸的合成，在氨同化和转化成有机氮化合物的代谢中起重要作用。
测定原理：
GDH催化NH4+、α-酮戊二酸和NADH，生成谷氨酸和NAD+，引起340nm吸光度下降。通过测定340nm吸光度的下降速率，计算GDH活性。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；
粗酶液提取：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、样本测定
（1）在试剂二中加入10mL试剂一充分溶解混匀，置于37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴5min；现配现用（配后12h内用完）；
（2）在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本和190μL试剂二，混匀，立即记录340nm处20s时的吸光值A1和 5min20s后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2。
谷氨酸脱氢酶GDH测试盒
GDH活性计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、血清（浆）中GDH活力的计算:
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GDH（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=643×ΔA
2、组织、细菌或细胞中GDH活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GDH（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GDH（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总) ÷T=643×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GDH（nmol/min/104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=1.286×ΔA
V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.01 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
b.用96孔板测定的计算公式如下
1、血清（浆）中GDH活力的计算:
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GDH（nmol/min /mL）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=1286×ΔA
2、组织、细菌或细胞中GDH活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GDH（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GDH（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=1286×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。
GDH（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(500×V样÷V样总) ÷T=2.572×ΔA
V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：96孔板光径，0.5cm；V样：加入样本体积，0.01 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
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文献和实验谷氨酸脱氢酶 glutamate dehydrogenase
一种催化使氨还原性地固定到α -酮戊二酸上形成谷氨酸反应的酶。 EC． 1． 1． 1． 3[NAD（ P） ] 1． 1． 1． 4（ NADP）。 α -酮戊二酸 NH3 NADH H 谷氨酸 NAD 它广泛分布于生物中，在动物，存在于线粒体中。虽然反应是可逆的，但平衡具有朝向合成谷氨酸的倾向。因物种的不同，辅酶的特异性有所不同，在植物中是 NAD，酵母是 NADP，动物中虽不论那种辅酶都有作用。但 NAD则较其他辅酶的效力高出数倍。反应
C10 H17 N3 SO6 。为γ -L-谷氨酰 -L-半胱氨酞甘氨酸（ 1）。谷胱甘肽如（ 2）所示在活体内参与氧化还原反应。所以具有保护如组织蛋白酶、番木瓜酶及琥珀酸脱氢酶那样具有 SH基酶的 SH基作用。另外是催化甲基乙二醛形成乳酸的乳酰谷胱甘肽裂解酶（ EC． 4． 4． 1． 5）不可缺少的辅助基质。在解毒作用中形成硫醚氨酸，被认为有毒物质先与谷胱甘肽结合使谷氨酸与甘氨酸部分切断。
反应。在缺乏氨基酸氧化酶的高等动物中，首先进行转氨酶所催化的反应（Ⅰ），再以谷氨酸为媒介，在谷氨酸脱氢酶催化的反应（Ⅱ）中生成氨，在进行氨基酸氧化脱氨的同时，通过逆反应参与氨基酸的生物合成。也有以丙氨酸为氨基供体的转氨酶。（2）谷氨酸、天冬氨酸等的氨基酸的酰胺基也能直接作为氨基供体，但这时被转移的是α-氨基，而酰胺基则作为氨波游离出来。（3）在动物的肝脏、微生物中发现鸟氨酸、r-氨基丁酸、β-丙氨酸等的。ω-氨基转移到α-酮酸的反应，在这种情况下，除α-酮酸外，醛类也能成为氨基受体。鸟氨酸特别
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