万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
人
- 细胞类型:
正常细胞
- 肿瘤类型:
详见操作说明
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 库存:
大量
- 英文名:
Immortalization of Human Nasal Mucosal Epithelial Cells
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见操作说明
- 运输方式:
常温/干冰运输
- 器官来源:
人
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮样,多角形细胞
- 免疫类型:
详见操作说明
- 物种来源:
人
- 相关疾病:
详见操作说明
- 组织来源:
鼻黏膜组织
- 规格:
株
人鼻黏膜上皮细胞永生化
|
一、细胞基本属性 |
|
|
细胞名称 |
人鼻黏膜上皮细胞永生化 |
|
细胞别称 |
人鼻黏膜上皮细胞永生化 |
|
商品货号 |
ZY-PC6171HY |
|
种属来源 |
人 |
|
年龄性别 |
- |
|
组织来源 |
鼻黏膜组织 |
|
生长特性 |
贴壁生长 |
|
细胞形态 |
上皮样,多角形细胞 |
|
背景简介 |
- |
|
生物安全等级 |
- |
|
细胞规格 |
5*10^5cells/T25培养瓶 |
|
支原体检测 |
无 |
|
培养基 |
含FBS、EGF、Hydrocortisone、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等 |
|
培养条件 |
气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
|
冻存条件 |
无血清冻存液,液氮储存 |
|
倍增时间 |
~24-30小时 |
二、细胞接收后的处理
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于室温放置约1h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2) 请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 贴壁细胞:细胞在室温中放置1h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4) 细胞运输途中脱落操作方法:把脱落的细胞收集离心后弃上清,用PBS清洗一遍,离心弃上清,在离心管中加入1ml胰酶吹散消化20秒左右,加完全培养基终止消化后离心重新铺平,剩下的贴壁细胞就按照正常贴壁细胞传代方法操作。
5) 备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
三、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a) 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b) 加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(视细胞消化情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。
c) 轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d) 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
贴壁细胞传代注意点:
l 一定要PBS洗一遍。
l 细胞多观察几次掌握时间,不要在细胞没有基本脱落就终止消化然后吹打下来,这样细胞 更容易分化和死亡。
l 不要一直对细胞吹打
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a) 收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b) 根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度1×10^6~1×10^7/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c) 将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
四、培养注意事项
1) 细胞出现问题,予以重发情况
a) 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
b) 细胞污染问题,请在收到产品3 天内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
c) 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后2 天后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
d) 干冰冻存发货的细胞复苏后2天后或常温发货的细胞静置2 小时候并且未开封,出现污染,重发;
e) 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,和每天的细胞照片,核实后予重发;
f) 细胞收到当天以及第2,3 天请拍照,3 天未告知的,视为产品合格。4-7 天内出现问题需提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。
2) 细胞出现问题,不予以重发的情况
a) 客户操作造成细胞污染,不重发;
b) 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
c) 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
d) 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3 天的细胞状态照片,不重发;
e) 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
f) 收到细胞并发现问题与客服人员沟通的时间证明大于7 天的,不重发;
g) 视具体情况而定
五、注意事项
1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。
3. 该细胞仅供科研使用!说明书仅供参考以实际到货说明书为准!
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验【新品】滴鼻给药,精准狙击!| AAV-GC09 开启鼻部基因递送“高效靶向”新时代
,在维持呼吸道健康方面发挥着至关重要的作用。 鼻上皮细胞类型(PMID: 37762530) 基因疗法的成功部分取决于病毒载体及其有效地将遗传物质传递到目标细胞的能力。作为一种安全的、有潜力的应用载体,AAV在基因功能研究和基因治疗递送载体中占据主导地位。目前,AAV1、AAV2、AAV5、AAV6、AAV9 等血清型已在动物模型中尝试用于鼻部递送,然而,这些血清型普遍存在转导效率低、细胞类型特异性差、易被血液吸收导致系统暴露等问题,目前缺乏一种能够高效、持久且精准靶向的鼻黏膜
方法。大鼠、免或狗可使用光学或电子显微镜观察。以大鼠为例,光学显微镜观察方法为:大鼠麻醉,单侧鼻腔给药后处死,取中隔黏膜染色,观察黏膜组织结构的变化,包括给药侧中隔黏膜上皮的厚度、黏液释放量、上皮细胞排列的有序程度、上皮细胞核的大小及规则程度等等。扫描电子显微镜主要考察黏膜表面纤毛形态的改变,包括数量、排列情况等,相对较易掌握。共聚焦激光扫描显微镜是一种新兴的技术,可观察生物标本的三维图象,已被用来确定药物通过鼻黏膜转运的通道,研究促进剂对药物转运和细胞形态的影响。人体的鼻黏膜形态学评价可用鼻内窥镜观察
脑靶向递送|抗体也能“鼻脑递送”?甘油辅助双抗联合增强黑色素瘤脑转移免疫治疗
或 Cy5-抗 CD73 后 2 小时,脑切片荧光显微图像。细胞核用 DAPI 染色。H-K. 嗅球、皮层、海马和小脑中的荧光强度定量。L. 经鼻递送或静脉注射 FITC-IgG 后 2 小时,脑组织切片中抗体分布的代表性免疫荧光图像;血管用 CD31 染色。 4. 甘油通过暂时打开鼻黏膜紧密连接,帮助抗体经鼻进入脑内 研究团队用鼻黏膜上皮细胞模型检测跨上皮电阻(TEER)。5% 甘油处理后,TEER 下降,说明鼻黏膜屏障通透性增加。透射电镜结果也显示,5% 甘油处理 1 小时后,鼻黏膜上皮紧密
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










