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英文名称:
规格:250g
碱性L-G培养基基础产品说明与用途:用于酸性物质处理的结核杆菌标本
碱性L-G培养基基础使用操作规程:
目的:建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围:本操作规程适用于营养琼产品脂培养基的配制使用。
职责:质检室质检员负责本操作规程的执行,质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
本文由碱性L-G培养基基础生产厂家上海哈灵生物科技有限公司提供 www.sh-haling.com
碱性L-G培养基基础实验内容:
1.仪器与试剂:
1.1.托盘天平、消毒锅、电实验冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
1.2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1.称取营养琼脂17克,于1000ml三角瓶内,加入500ml纯化水,充分搅拌后,塞上棉塞,用牛皮纸包好,扎紧瓶口。
2.2.置消毒锅内,于115℃高压灭菌30分钟,取出放置至室温后,放入实验冰箱,备用(实验冰箱温度控制在1-4℃)。
2.3.使用时从实验冰箱取出,放置室温后,置水浴中加热,使融,全部融化后取出,放置约45℃时使用。
2.4.使用时,用75%乙醇擦瓶子外围,打开牛皮纸包扎外壳,在火焰附近慢慢旋下棉塞,左手拿培养皿,右手拿三角瓶,慢慢倾倒至培养皿中,每皿注入约
15ml完毕后,将棉塞在火焰上方烧烤数秒,立马塞入瓶口,包上牛皮纸外层,用线绳扎好,留下次使用。(此瓶培养基只允许使用两次,且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养)。
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文献和实验,使用 1 mL 移液器吸出上层较小颗粒,继续剪碎组织,重复加入1640基础培养基,直至所有的组织大小均符合要求。 将肿瘤组织悬液转移至 50 mL 离心管中,加入 1640 基础培养基,250 g离心5 min,弃上清,加入4.5 mL 的 1640 基础培养基,重悬细胞沉淀并转移至培养皿中。 加入 500 μL 的 10×Triple Enzyme stock solution 混合酶溶液,轻轻吹打至充分混匀,转移至37℃水浴摇床消化孵育 1~2 h。 消化结束后用 1640 基础培养基
相同条件下,L-谷氨酰胺几乎完全降解。 32. 什么培养基中可以省去加酚红? 酚红在培养基中用作PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。 33. 如何用台盼兰计数活细胞? 用无血清培养基把细胞悬液稀释到200~2 000个/毫升
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