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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海笃玛生物科技有限公司
- 保存条件:
-20°
- 规格:
50管/24样
半胱氨酰亚砜裂解酶(L-cysteine sulfoxide lyase, CSL)试剂盒
分光光度法50T/24S
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱),十字花科芸薹属
(如卷心菜,菜花,西兰花),以及豆科中的合金欢属中,并通常被称为蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰转肽酶和半胱氨酸亚砜裂解酶的作用下转化成香菇精,以及产生bing酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是内源性甲醛生成的关键酶之一,测定CSL活性对于研究食品安全具有重要意义。
测定原理
CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亚砜反应产生bing酮酸,与2,4-二硝基ben肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm下有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水。

一、生化试剂盒储存条件
温度控制
1. 常规液态试剂(酶工作液、显色剂):2-8℃冷藏,避免靠近冰箱制冷口结冰。2.高活性组分(酶制剂、抗体、标准品母液):-20℃冷冻,建议分装,杜绝反复冻融。
3.特殊敏感试剂(稀有酶、荧光标记物):-80℃超低温长期储存。
4.干粉试剂、稀释液:15-25℃室温存放,远离热源。
5.避光要求酶、荧光探针、还原性底物等需避光储存,用棕色瓶 / 避光袋包装,避免阳光直射和强光照射。
防潮防污染
1.干粉试剂需置于湿度≤60% 的干燥环境,搭配干燥剂防潮。
2.试剂开封后及时密封,防止氧化、微生物污染;不同试剂盒试剂分开存放,避免交叉污染。
特殊组分
标准品 / 质控品与核心试剂同条件储存;配套包被板需密封冷藏,防止涂层脱落。

二、生化试剂盒结果计算
数据预处理
1.计算标准品、样本复孔的平均信号值(OD 值 / 荧光强度),剔除偏差>10% 的异常值。
2.用标准品、样本的平均值 减去空白对照平均值,得到校正信号值。
绘制标准曲线
横坐标 = 标准品浓度,纵坐标 = 标准品校正信号值,拟合线性回归方程 Y=aX+b。
要相关系数 R2≥0.99,否则重新实验.
样本结果计算
1.浓度类(代谢物 / 离子)

2.酶活类:

生化试剂盒关键特性
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类型 |
核心内容 |
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检测原理 |
酶促反应比色法(部分荧光法),通过吸光度定量目标物浓度 / 酶活,兼容分光光度计与酶标仪 |
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试剂组成 |
含提取液、反应底物、酶制剂等,常规组分 2-8℃冷藏,高活性试剂(如部分粉剂)-20℃冷冻,需分装避免反复冻融 |
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样本处理 |
组织多按 1:5-10(g:mL)冰浴匀浆,细胞 / 细菌超声破碎后低温离心取上清,全程冰浴防酶失活 |
|
结果计算 |
按标准曲线法,扣除空白后拟合 Y=aX+b,代入样本信号值计算浓度,酶活需结合反应体系体积、时间与样本量换算 |
|
储存与效期 |
未开封 2-8℃冷藏有效期约 12 个月,开封后尽快用完,特殊组分按说明书调整储存温度 |
注:该产品仅用于科研实验。

样本采集后快速送抵实验室的操作规范
采样后即时预处理样本采集后立即密封容器,用封口膜缠绕瓶口防止渗漏;做好清晰标记,注明样本编号、采集时间、样本类型,避免混淆。若为易降解样本(如血液、组织匀浆),采集后尽快离心分离上清,减少细胞代谢和微生物繁殖对样本的影响。操作全程避免样本剧烈振荡,防止成分破坏或气泡产生,影响后续检测。
分类型选择转运条件常规生化样本需 4℃冷藏转运,使用便携式冷藏箱并添加冰袋,避免冷冻导致样本成分变性;核酸 / 蛋白类样本需 - 20℃低温转运,选用液氮罐或干冰保温箱,确保全程低温环境,杜绝反复冻融;微生物检测样本可在室温(<25℃)下转运,使用密封硬质容器,防止样本泄漏造成污染。
优化转运流程,缩短送达时间规划最短转运路线,优先安排专人直送;若需物流转运,选择冷链快递并标注 “加急”“生物样本” 醒目标识,保障转运优先级。批量样本转运时分类装箱,做好防震缓冲处理,避免运输过程中容器破损;同时附带样本信息单,明确接收实验室、联系人及紧急联系fang式。转运前与实验室提前沟通,告知样本类型、数量及预计送达时间,便于实验室提前准备接收和处理工作。
特殊样本的应急处理时效性极强的样本(如活细胞、新鲜组织)采用冰浴即时转运,严格控制转运时间在 1-2 小时内。若转运距离较远,可在样本中添加适量稳定剂(如蛋白酶抑制剂、RNA 酶抑制剂),延缓样本成分降解,保证检测有效性。
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文献和实验mmol/L 磷酸钾、0.5% 二甲基亚砜,pH 7.0。 ( 2 ) 分光光度仪:至少能 1s 读 1 次数值,如,Ultrospec 3000 (Amersham- Pharmacia) 或 V-550 ( Jasco)。 ( 3 ) 分光荧光计,如,FluoroMax-2 ( Jobin- Yvon) 或 FP-6500 ( Jasco)。 ( 4 ) 磷酸缓冲液 [ 见 16.2.2 (18)]。 ( 5 ) 尿素:超纯,至少 99% 纯度(ICN )。 4. 注
条件,使用 DNA 酶切割 DNA 获取所需大小的片段为进一步筛选大小合适的片段,通过琼脂糖凝胶电泳纯化酶切片段,再经内部引物延伸反应再组装,最后使用常规 PCR 扩增。然而,精确 控制 DNA 酶的酶切条件,如使用的酶及 DNA 的量、反应时间及温度等非常复杂,需要精细的优化摸索。其他的一些方法,如交错延伸程序(staggered extension process, StEP [ 4 ] ) 和随机引物法(randompriming )[ 5 ] 都受 DNA 组成的限制,并且由于缺少对重组
(3)变性温度是否准确:PCR仪指示温度与实际温度是否相符,过高酶在前几个循环就迅速失活;过低则模板变性不彻底。 (4)反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶,应在未加Taq酶以前,将反应体系95℃加热5-10分钟。 (5)引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。 (6)使用PCR试剂盒时还应注意: ①是否严格按照说明书操作; ②试剂使用前是否充分混匀
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