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- NEB
- R0101
- 2026年02月05日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | R0101 | EcoRI | EcoRI |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| R0101L | EcoRI | EcoRI | 50,000 units |
| R0101M | EcoRI（高浓度） | EcoRI(High Concentration) | 50,000 units |
| R0101S | EcoRI | EcoRI | 10,000 units |
| R0101T | EcoRI（高浓度） | EcoRI(High Concentration) | 10,000 units |
| R0101V | EcoRI | EcoRI | 5,000 units |
产品特点
- 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
- 可提供高保真（HF®）版本酶（NEB #R3101），随附 rCutSmart™ 缓冲液
- 现随附 1 管紫色凝胶上样染料（6X）
- 限制性内切酶切位点：G/AATTC
EcoRI 提供高保真版本酶 EcoRI-HF®（NEB #R3101）。
高保真（HF）限制性内切酶在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性；统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会显著降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶（Time-Saver）标准，可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA，也可实现过夜酶切而不会造成 DNA 降解。HF 限制性内切酶在改造时便将性能作为重要指标，可在更宽的条件范围下具有完全活性，最大限度地减少非特异性酶切产物，同时为实验设计提供灵活性。
如需有关 NEB 限制性内切酶质量控制的详细信息，请访问我们的限制性内切酶质量页面。
产品来源
大肠杆菌菌株，其携带从大肠杆菌（E. coli） RY13（R.N. Yoshimori）克隆的 EcoRI 基因。- 产品类别:
- C 至 G 字母开头的限制性内切酶产品,
- Time-Saver Qualified Restriction Enzymes
- 应用:
- Fast Cloning: Accelerate your cloning workflows with reagents from NEB,
- Restriction Enzyme Digestion
备注：以上仅为 R0101 的部分产品信息，如需NEB货号 R0101 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等，请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验1，2，3，4和EcoRI Buffer中进行。反应完成后通过加热可以是蛋白失活，从而不需纯化便可以进行连接反应。 4.XbaI是典型的dam甲基化敏感内切酶，您可以分析您的载体序列，看是否是甲基化敏感，如果是甲基化敏感，那么您的载体肯定切不开，可以有两种解决方案：A.用甲基化缺陷型菌株转化提取质粒之后再做酶切,NEB有免费赠送的甲基化缺陷型菌株；B.可以用phi29DNA聚合酶进行链置换反应，再进行酶切就可以切开了。 NEB是高手，不知是不是NEB公司的人。请教几个问题：
酶的活性也是影响克隆成败的关键因素： 1）如果限制性内切酶因为保管不当，导致酶失活或部分失活，那么依据DDDesigner计算出来的酶量就不能保证完全酶切。 2）如果制备的质粒DNA的质量不好（如细菌培养时间过长，质粒制备时裂解不充分或裂解时间过长等），那么对这种质粒DNA进行酶切时，即使酶活性正常，酶量足够，也不能实现完全酶切，因为其中很多质粒DNA已经变性，不能被切开。 下面是一个简单的实验设计，可以用于分析各种可能的问题。 如:拟用NEB的EcoRI
常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)（BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等） 在分子克隆实验中，限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体，要根据载体选择合适的内切酶（当然，使用T载就不必考虑了）。先将引物设计好，然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
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