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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 保质期:
1年
- 保存条件:
储存-20℃
- 规格:
2T/5T
| 规格: | 2T | 产品价格: | ¥720.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5T | 产品价格: | ¥1180.0 |
外泌体蛋白鉴定试剂盒(GM130)
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产品名称 |
货号 |
规格 |
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外泌体蛋白鉴定试剂盒(GM130) |
rcnexo117 |
2T/5T |
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保存方法:-20℃ 有效期: 12个月
注:本产品仅用于科学研究,不可用于临床。
一、产品简介:
外泌体鉴定的国际标准《细胞外囊泡杂志MISEV2018》对外泌体的表征规定了最小试验要求:Western blot对外泌体标志蛋白进行检测,至少需要3个阳性蛋白(至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白)、1个阴性蛋白质标志物。外泌体阳性蛋白标志物可选择跨膜蛋白CD9、CD63、CD81,以及溶质蛋白TSG101、Alix、HSP70。外泌体阴性蛋白标志物可选择内质网蛋白Calnexin、细胞核蛋白histone H3或高尔基体蛋白GM130。
二、产品组分:

注:1T为提取100ul外泌体的量,有些试剂较少,使用前请离心。
三、操作方法:
1. 取100ul新鲜的外泌体或者冻存的外泌体至离心管。
2. 向离心管中依次加入裂解液A轻轻混匀,然后加入裂解液B,混匀后置于冰上裂解10min。
|
外泌体体积 |
裂解液A |
裂解液B |
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100ul |
5ul |
35ul |
|
200ul |
10ul |
70ul |
注:试剂加样前请离心,请按照加样顺序加样。
3. 离心机提前预冷,裂解结束,涡旋一下后离心(4℃,12000g,15min)。
4. 离心结束后取上清液BCA定量检测蛋白浓度。
5. 加入5X loading buffer(裂解液:5X loading buffer=4:1),100℃煮样10分钟,注意用试管架压防止爆盖子(使蛋白加热变性带上负电荷)。
6. 下同WB的实验步骤。
u 经过测试的应用:
Western Blot (WB) 稀释比例WB : 1:10000
u 产品信息:
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名称 |
Host / Isotype |
稀释比例 |
反应性 |
蛋白大小 |
|
GM130抗体 |
Rabbit / IgG |
1:10000 |
human, mouse, rat |
130 kDa |
|
HRP-羊抗兔二抗 |
Goat |
1:1000 |
Rabbit IgG |
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Storage Conditions |
Store at -20°C. Stable for one year after shipment. |
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u 结果展示:

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文献和实验可通过传递信息影响目标细胞的功能,激活细胞信号通路,在免疫、凝血、肿瘤等生理病理过程中发挥作用。外泌体可以作为临床诊断中的生物标志物或疾病治疗的靶点,同时也可以作为药物载体,参与神经疾病和癌症等多种疾病的病理过程。 三、关键步骤 — 外泌体分离 外泌体的分离纯度对外泌体的功能研究非常重要,但是外泌体的分离一直是困扰外泌体研究人员的一个难题。虽然分离外泌体方法有很多种,包括差速超速离心法(超离法)、超滤法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、试剂盒法等。 但目前
: 准备外泌体样本,并将外泌体样本置于仪器中检测。检测结果如下: 图二 NTA 鉴定脑组织外泌体大小 从 NTA 结果中可以看出,检测到的外泌体颗粒大小在 30-150nm 范围,符合外泌体的大小,且颗粒浓度在 2*10 的 11 次方以上(由图中 particles 数乘以稀释倍数)。 四、WB 鉴定外泌体的蛋白 marker: 按照实验室常规操作进行外泌体样本的 WB 实验。本次测试选择了三个蛋白指标进行外泌体蛋白鉴定,分别为二阳一阴,即 CD9、TSG
、NTA 鉴定外泌体的大小和颗粒浓度: 准备外泌体样本,并将外泌体样本置于仪器中检测。检测结果如下: 图二 NTA 鉴定肿瘤组织外泌体大小 从 NTA 结果中可以看出,检测到的外泌体颗粒大小在 30-150 nm范围,符合外泌体的大小,且颗粒浓度在 3*10 的 10 次方以上(由图中 particles 数乘以稀释倍数)。 四、WB 鉴定外泌体的蛋白 marker: 按照实验室常规操作进行外泌体样本的 WB 实验。本次测试选择了两个蛋白指标进行外泌体蛋白鉴定
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