人EGFR基因T790M(c.2369C>T)点突变探针法q

Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手

的微生物实验操作习惯预防微生物污染。 2. 使用灭菌的，一次性的塑料器皿和自动吸管抽提 RNA，避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。例如，使用 RNA 探针的实验室可能用 RNA 酶 A 或 T1 来降低滤纸上的背景，因而某些非一次性的物品（如自动吸管）可能富含 RNA 酶。 3. 在提取裂解液中，RNA 是隔离在 RNA 酶污染之外的。而对样品的后续操作会要求用无 RNA 酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在 150 °C的烘箱中烘烤4小时。塑料器皿可以在 0.5 M

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光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。3.4 LUX@Primers法 LUX@ (light upon extention) 引物是利用荧光标记的引物实现定量的一项新技术。目标特异的引物对中的一个引物3’端用荧光报告基团标记。在没有单链模板的情况下，该引物自身配对，形成发夹结构，使荧光淬灭。在有目标片断的时候，引物与模板配对，发夹结构打开，产生特异的荧光信号。4. Real-time qPCR和常规PCR的区别 实时检测（在对数扩增时期

PCR技术应用五：苯酶同尿症诊断

T418P 12 A →C PAH基因点突变的PCR检测 (一)PCR-ASO斑点杂交 　　在我国人群中，目前所发现的PAH基因突变以点突变为主，因此可以此来合成相 应的突变型寡核苷酸探针.来检测PKU患者的点突变，ASO法是最为有效的点突变检测 技术.随着非同位素标记探针的出现及反向斑点杂交的应用，预记该方法的临床应用 将愈来愈广泛.下表训列即为利用PCR-ASO检测时所用的引物. 探针