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上海觅拓生物
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50管/48样
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文献和实验倍,故测定时应避免溶血。如不能及时测定,血清应及早和血块分离,避免红细胞中乳酸脱氢酶逸入血清中。乳酸脱氢酶测定的方法很多,根据酶作用的反应可分为二大类:一类利用顺向反应以乳酸为基质;另一类利用逆向反应,以丙酮酸为基质。根据测定方法不同又可分为紫外分光光度法和可见分光光度法。紫外分光光度法需用紫外分光光度计测定反应中辅酶I量的变化。可见分光光度法利用2,4—二硝基苯肼和丙酮酸作用,生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中呈棕色。目前较多使用以乳酸为基质的方法,此法所需的氧化型辅酶I较稳定,不似以丙酮酸为基质
相关专题 目的要求 (1) 了解乳酸脱氢酶活性测定原理。 (2) 学习用比色法测定酶活性的方法。 实验原理 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase简称LDH,EC.1.1.1.27, L-乳酸: NAD+氧化还原酶)广泛存在于生物细胞内,是糖代谢酵解途径的关键酶之一,可催化下列可逆反应。 LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多,其中紫外分光光度法更为简单、快速
,因此应根据实际情况进行合理的设置和应用。但是在临床实际工作中,仪器诸多因素如波长的准确性、半波宽的大小、比色杯光径及磨损与清洁度、温控的准确性、加样系统状况等若不符合要求或发生变化都会影响指示物的ε值或上述公式中的相关项,因此应在具体仪器条件下,定期检查和实际测定指示物的实测ε值和F值。因为纯NAD(P)H溶液不稳定,所以NAD(P)H的ε值需用葡萄糖己糖激酶法实测,实际操作为将某一浓度的葡萄糖溶液重复5-10次测定,得到相应的一组吸光度A值,求出Aˉ±s,注意s必须低于规定的批内允许值,再根据下面
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