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BIM, INTERNAL EPITOPE, RB X-100UG
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文献和实验on a 3" petri plate, the maximum practical density to allow isolation of individual colonies is about 100-200 colonies per plate. If we were to try to plate our library of 3.37 x 106 in such a way would need about 22,500 plates .
。 所以对于每一个特定的PCR反应来说,EX、RT、RB和RS都是常数,所以CT值与log X0成反比,也就是说,CT值与起始模板拷贝数(X0)的对数成反比,起始DNA浓度每增加1倍,CT值减小1个循环。根据CT值的定量是精确和严格的,而传统的终点定量则比较粗放。 如果读者有兴趣的话,也可以假设PCR的效率(即Ex)为100%,从上式推算出定量PCR标准曲线的最佳斜率和CT值的最佳范围
PCR PRIMER DESIGN AND REACTION OPTIMISATION
8.3, up to 50mM KCl, 1.5mM or higher MgCl2, primers 0.2 - 1uM each primer, 50 - 200uM each dNTP, gelatin or BSA to 100ug/ml, and/or non-ionic detergents such as Tween-20 or Nonidet P-40 or Triton X-100 (0.05 - 0.10% v/v)
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