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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
西宝生物400-021-8158
- 库存:
10
- 目录编号:
EKN0017B-50ml
- 保质期:
1年
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50ml
产品名称:羊抗人IgM(抗血清)
品牌:Seebio
货号:EKN0017B
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文献和实验1.同类系动物 用某一种抗原免疫某一品系的动物,分离纯化的Ab1再免疫相同品系的另外一只动物,可获得抗独特型体。例如Uytdegaag等将Ⅱ型脊髓灰质炎病毒免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术制备了单克隆抗体(Ab1),再用Ab1免疫BALB/c小鼠,制备了单克隆Ab2。 2.同种异型动物 Seto等从一只品系为a3b4家兔血清中纯化出IgG作为Ab1,然后免疫B/J品系家兔,得到了含有Ab2的免疫血清。用此方法制备的抗血清中,除了含有抗Id外,还含有抗同种异型决定簇的抗体。
1、主要试剂 (1)羊抗人C4抗血清 按说明书所示单扩效价扩大2-4倍稀释,或分别用含不同浓度抗体的琼脂糖凝胶浇板,选择峰高、清晰度适当的抗体浓度为最适工作浓度; (2)羊抗人B因子抗血清 按说明书所示单扩效价扩大3-5倍稀释,也可按选择C4抗血清稀释浓度的方法确定最适工作浓度; (3)电泳缓冲液 称取10.30g巴比妥钠,1.83g巴比妥,溶于1000mL蒸馏水中。此液为pH8.6,离子强度0.05的巴比妥缓冲液; (4)凝胶缓冲液 以定量测定时用1:4稀释的电泳缓冲液,B因子定量时
、生理盐水、带盖方盘。 2) 方法 a. 免疫琼脂板制备:将1.5%琼脂(用PH8.2、0.05M的巴比妥缓冲液配成),加热溶化,待琼脂冷至56℃加入适量抗血清(抗血清最终稀释度取决于抗血清所标化的稀释度),混匀,制成厚1.5mm的琼脂板,待琼脂凝固后打孔,孔径为3mm,孔距1~1.2cm。 b. 稀释参考血清及待检血清:参考血清用0.5ml蒸馏水溶解后使用,参考血清、待检血清稀释按要求进行。 c. 加样:将上述稀释参考血清
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