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iPSC-基因敲除

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  • CRISPR等新技术的出现使我们可以更加自由地修改基因信息。经过基因编辑的iPSC和ESC可以稳定地遗传突变基因,而由于干细胞本身具备极强的扩增与分化潜力,这一应用可以广泛用于基础研究、模型建立、生物药研发和药物筛选等场景。我们采用的是电穿孔递送CRISPR/Cas系统的方法对干细胞进行基因编辑,具有无滋养层、无抗性基因敲入、特异性高的特点。我们的团队在基因编辑领域有丰富的经验,可以根据客户的需求定制合适的基因编辑方案。
  • 上海
  • 2026年01月29日
    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 提供商

      上海跃赛生物科技有限公司

    • 服务名称

      iPSC基因编辑

    • 规格

      非风险项目,2个纯合克隆

    基因敲除是最基本和常见的基因编辑场景,常见的应用场景有:验证某目标蛋白质失活后对细胞造成何种功能的缺失,确定某基因编码的蛋白质在信号通路中处于哪个节点,等等。
    引入基因敲除的最简单手段是制造一段DNA双链断裂(Double-Strand Break,DSB),以使用CRISPR工具举例简述这一过程:和sgRNA结合的Cas9蛋白在sgRNA的引导下与目标基因结合,在PAM序列上游(5’端)的第3和第4个碱基之间制造DNA双链断裂。在检测到DNA双链断裂后,如果细胞不是刚好处于复制周期内存在一对姐妹染色体(Sister Chromosome)作为修复模板,细胞会启动被称为非同源性末端链接(Non-homologous End Joining,NHEJ)的机制来对DNA进行不完全的修复。在这一系列过程中,名为Artemis的内切/外切酶会处理断裂的DNA末端,随机地移除1至数个碱基,之后连接酶就可以将处理过后的断裂DNA连接起来。在连接的过程中也有可能随机插入数个碱基。由于遗传密码的编码机制是3进制,删除/插入的碱基数不为3的倍数即可视为成功的基因敲除。

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