- ￥105
- 上海经科
- JK3063
- 2026年01月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温,12个月
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现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
500ml
细胞生物学试剂
名称：EDTA细胞消化液(0.02%)
货号：JK3063
用途：细胞消化液的一种，含有pbs和edta,不含胰蛋白酶,对细胞损伤较小。
储存条件：室温,12个月
产品简介：
EDTA细胞消化液(0.02%)由PBS、EDTA(乙二安四乙酸)配制而成，经无菌处理，不含胰蛋白酶，在细胞消化中的作用原理主要基于其螯合作用，通过选择性结合细胞间和细胞-基质连接处的二价阳离子（如Ca²+、Mg²+），破坏细胞黏附系统的稳定性，对细胞损伤较小，能有效地使贴壁细胞与培养瓶或培养皿表面脱离而达到分离细胞目的。
其特点是：1、作用温和；2、对细胞的损伤和破坏极小，不影响细胞生物学特性，是肿瘤细胞的极好细胞脱壁方法；3、可以在血清存在的情况下进行消化。消化后的细胞可进行传代培养，亦可用于提取核蛋白和胞浆蛋白、Western Blot、免疫共沉淀等实验，通常室温下3~10min即可消化下大多数贴壁细胞。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
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文献和实验弃血清---PBS洗一或两遍---加1-2ml的消化液（0.1%的胰酶+0.02%的EDTA）消化45秒作用（不用放回培养箱，细胞面紧贴自己的手掌心，平放）---弃去胰酶后让残留的胰酶再作用1分钟----立即加含血清培养基终止胰酶的作用---轻轻吹打细胞很容易就脱离瓶壁。注意，吹打次数不要太多，机械损伤对细胞的损害非常大，吹打过程中也不要有太多气泡，以免气泡的剪切力损害细胞。一般而言，细胞消化传代后，第二天应常规换一次液。消化的时候，温度对胰酶活力的影响也很大，相同浓度的胰酶冬天的时候消化
问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用！多谢！答：1、胰酶是0.25%,这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。如果对贴壁没
易造成细胞膜损伤而出现细胞坏死的假阳性，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-荧光素的结合从而干扰对于细胞凋亡的检测。同时，胰酶细胞消化液中应尽量不含EDTA，因为EDTA可能会影响Annexin V与磷脂酰丝氨酸的结合。 加入步骤1中收集的细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻悬浮细胞并计数。 注意：加入细胞培养液非常重要，一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞，另一方面细胞培养液中的血清
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