- ￥8680
- PCR验证+WB 全膜验证
- 武汉
- 2026年05月01日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
EnkiLife
- 服务名称：
基因过表达稳转细胞系构建
- 规格：
≤2kb
基因过表达稳转细胞系构建
技术介绍
基因过表达（gene overexpression）稳转细胞系的构建核心在于将外源基因通过合适的载体和递送手段，将目的基因序列整合进宿主基因组，并通过抗性或荧光标记进行严格筛选，进而得到目的基因能够在宿主细胞内长期且稳定表达的多克隆细胞或者单克隆细胞株。
技术应用
基因过表达稳转细胞系通过在目标细胞里面持续高表达目标基因，可直接观察“增益‑功能”(gain‑of‑function)效应，帮助阐明基因在细胞增殖、凋亡、分化、代谢等过程中的作用；该技术已广泛应用于基因功能解析、药物筛选、重组蛋白生产以及疾病模型的建立等多个科研与产业领域，为深入探究生物学机制和加速新药研发提供了可靠的技术平台。
服务流程
交付标准
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构建好的细胞株一瓶或者2支冻存株（包含空载对照）；
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电子版构建报告（包括PCR验证及WB 全膜验证结果）；
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20 μL 验证使用的WB抗体。
备注：非编码基因不包含WB验证及抗体。
平台优势
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种子细胞优良：恩玑生命细胞平台所有的细胞，来源正规，人源细胞均可提供STR验证；
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产品质量保证：采用 RT-qPCR 和 WB 验证，保证表达水平；
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WB 全膜验证，（恩玑官网有的抗体可以不需要客户提供抗体）；
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赠送WB验证抗体20 μL（仅限恩玑官网有的抗体）。
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文献和实验这里说的稳转细胞系的构建是指慢病毒转染构建的稳转细胞系，可以构建表达细胞系，也能构建敲降细胞系，经常有人问我什么叫稳转和顺转的区别。瞬转细胞系，一般情况下能够稳定表达最多长一周左右，而稳转细胞系，只要构建成功就能稳定表达，没有时间限制，但是也不是肯定的，一般实验构建的细胞系超过 10 代以后，这个细胞系就有可能不靠谱了。接下来，咱们讲讲稳转细胞系的构建。一般来讲 shRNA 用的是 HIV 病毒，虽然已经经过处理，但是一听这名字也觉得渗人，无论如何保护自己是在实验室永葆青春的基础，所以一定
，无法达到持续表达外源基因的目的。一般用转染试剂进行质粒转染，多是瞬时转染。非常好，你能区分什么时候需要构建稳转株吗？细胞：需要构建稳转株的，有这些类型：1. 长期在目的细胞中研究基因功能；2. 部分蛋白半衰期极长，瞬时 RNA 只能干扰表达，无法去除已经表达的目的蛋白，想要实现更好的基因干扰效果；3. 想要实验更精准，筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究；4. 需要用诱导表达系统的，主要是一些致死基因或者是需要时空表达的；5. 需要用细胞做动物实验的，比如裸鼠成瘤等。以下实验就不需要构建稳定
目前慢病毒载体主要应用在以下几个方面： 细胞基因治疗（截止目前，已上市的 CAR-T 产品有 9 款采用了慢病毒载体递送 CAR 基因） 基因表达调控（过表达、RNA 干扰研究等） 基因编辑（CRlSPR/Cas9 gRNA 文库筛选、基因敲除、敲入、点突变、基因激活/抑制） 稳转细胞株构建 活体细胞成像追踪 转基因动物 图 1 慢病毒载体的主要应用方向 应用案例 案例 1：用慢病毒载体进行基因过表达，构建稳转细胞株，研究葡萄糖激酶在前列腺癌（PCa）中的作用[1] 细胞
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
