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Application
Features and Benefits
- 最大限度地提高分离细胞的存活率和产量: 采用了含较少的梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性,降低内毒素含量的酶混合物。
- 依赖更高的比活性的酶混合物:由于较高纯度胶原酶I+II(HPLC分析测定)。
- 获得更高的实验重现性: 由于批次间的一致性。
- 提高安全性:采用了不含任何哺乳动物或鸟类组织衍生源材料的酶。
General description
Other Notes
Preparation Note
工作浓度:Liberase研究级酶工作浓度
Liberase酶的比活性显著高于传统胶原酶。即Liberase研究级纯化酶的工作浓度(mg/ml)将会低于传统的胶原酶。
当应用列表中不含有相应的应用时,首次需使用0.08–0.28 Wünsch单位/ml的Liberase TM研究级浓度。目的是确定Liberase研究级酶混合物的最佳起始浓度。这仅是一个起点,而最终的浓度可能会随着不同的过程以及传统胶原酶的批次间差异而发生变化。
胶原酶工作浓度
将您之前的胶原酶工作浓度(mg/ml)乘以其比活度(Wünsch单位/mg,[如上述测定所得]),得到Wünsch单位/ml。为确定需要使用的Liberase研究级酶量,首先将您的胶原酶工作浓度(Wünsch单位/ml)乘以您工作酶溶液的总体积,获得所需的总胶原酶活性(Wünsch单位)。除以Liberase研究级储液浓度所需的总胶原酶活性(“重悬和储存”)。这代表工作酶溶液中所用的Liberase研究级酶混合物储液的体积(ml)。
储存条件(工作溶液):储液分装成一次性用量,于-15至-25 °C保存。
注意:避免反复冻融!
将整管都重复溶。不要分装称量冻干粉。将水分引入瓶中会导致酶活性下降。
把小瓶放在冰上,使冻干的酶再水化。
在2到8°C的温度下轻轻搅动小瓶,直到酶完全溶解(最长30分钟)。
根据所采用的溶解研究级Liberase纯化酶混合物的组织分离缓冲液的具体类型,可能会观察到少量沉淀,这些沉淀很容易溶解在稀释的工作溶液中,对酶活性没有影响。
取一份装的储备溶液,制备工作溶液。
复溶体积
2 ml(每瓶5mg-10mg规格),10 ml(每瓶50 mg-100 mg规格)
胶原酶WA¼nsch(单位/毫升)
13 (每瓶5 mg-10 mg规格),26 (每瓶50 mg-100 mg规格)
胶原酶总浓度[mg/ml]
2.5 (每瓶5 mg–10 mg规格), 5.0 (每瓶50 mg–100 mg规格)
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文献和实验性。 罗氏胶原酶与Liberase系列产品的替换比较 小贴士: 1. Liberase系列产品根据胶原酶和中性蛋白酶的不同配比,分为不同消化活性的5种产品。您可以参考其他实验室的研究或已发表文献,进行合适产品的选择和操作流程参考。 2. 对于新的组织细胞的消化尝试,建议从Liberase TM开始您的实验,Liberase TM的消化活性范围对各种组织具有良好的通用性。 3. Liberase中Collagenase I + II 的纯度很高,与常规胶原酶消化实验
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