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- iCell
- iCell-h642
- 2026年01月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
1*10⁶Cells/T25培养瓶
细胞介绍
HIEC-6是从健康供体的小肠中分离的贴壁细胞系。非恶性和非致瘤性，该细胞系模拟正常胃肠(GI)功能，经常用作结肠直肠癌研究中的对照。该细胞系可用于模拟胃肠(GI)屏障。它可用于研究正常肠细胞增殖、存活、干细胞和导致谱系特异性分化的分子机制。还可以研究激素、生长因子、细胞外基质分子、药物代谢和致癌因素对肠功能的影响。这是一种非持续生长的人肠上皮细胞系，表达上皮细胞角蛋白和肠隐窝细胞的功能标记。它们表现出典型的肠隐窝细胞增殖和未分化特征。
细胞特性
1） 来源：17-19 女性 小肠
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途：仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备
1） 准备Opti-MEMTMI 减少血清培养基(Gibco目录号31985070)；20 mM HEPES，10 mM GlutaMAX 10 ng/mL EGF，优质胎牛血清，4%；双抗1%。
注意：由于有限的稳定性，表皮生长因子(EGF)应该在播种、进行液体添加和完全液体更换之前添加到新鲜的培养基的等分试样中。添加了EGF的培养基最佳使用期限是10天, 10 ug/mL EGF Stock: use 1 uL/1 mL culture medium
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。传代比例1：2，传代周期：2-3天。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理
1） 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例；
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×10^7个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10^6~1×10^7个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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文献和实验阴道可见的正常脱落上皮细胞： 1.鳞状上皮细胞：从外阴向内直至子宫颈外口的黏膜均被覆鳞状上皮。在其脱落细胞中可见底层、中层、表层3层细胞，细胞形态与正常脱落的鳞状上皮细胞基本相同。阴道上皮细胞形态变化与卵巢激素关系密切相关。 （1）底层细胞：分为内底层和外底层细胞。阴道涂片一般不见内底层细胞，仅在哺乳期、闭经后，阴道高度萎缩或糜烂、创伤时才见。 外底层细胞根据来源不同，分为3型：①宫颈型外底层细胞；②产后型外底层细胞；③萎缩型外底层细胞。 （2）中层细胞
实验材料： 1. 正常动物的肠或者手术切除标本的正常肠组织； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. TE液：Tyrode液加入2 mmol/L EDTA。Tyrode液含137 mmol/L NaCl、2.7 mmol/L KCl、0.36 mmol/L NaH2 PO4 、5.55 mmol/L 葡萄糖； 4. TEA液：TE液加入200mg/L氨苄青霉素、200mg/L庆大霉素和40
实验材料： 1. 2—3月龄的家兔胆囊； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 培养用液：以DMEM/F12为基础培养基，添加10%的胎牛血清、2 mmol/L谷氨酰胺、2μg/ml胰岛素、10 ng/ml表皮生长因子以及100 IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素。酶消化液为0.125%Ⅳ型胶原酶溶液。组织清洗液为DMEM培养液，并添加200 IU
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