- ￥3000
- iCell
- iCell-h566
- 2026年01月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
1*10⁶Cells/T25培养瓶
细胞介绍
该细胞系来源于患有 T 细胞淋巴母细胞淋巴瘤的 8 岁儿童恶性胸腔积液中收集的恶性细胞。这些细胞表达多种 T 谱系标记。细胞呈E玫瑰花结阴性，β2微球蛋白阳性。这些细胞对 Leu 5 (CD2)、绵羊红细胞受体、OKT 9 (CD71；转铁蛋白受体)、表面免疫球蛋白 (sIg -)、HLA DR、CALLA (CD10) 和 Tac (CD25) 呈阴性。
细胞特性
1） 来源：8 岁儿童恶性胸腔积液
2） 形态：淋巴母细胞，悬浮生长
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5）用途：仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1） 收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3） 悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备
1） 准备RPMI-1640（推荐iCell-0002）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理
1） 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法
悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL（不同细胞对密度要求不同，）可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3） 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例；
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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文献和实验由江上不二夫等从米曲霉（Aspergillus oryz-ae）的高峰淀粉酶中分离提纯的、具有鸟嘌呤特异性的核糖核酸酶，缩写为 RNA酶 T1 ． EC3． 1． 4． 8。分解 RNA时首先可逆地切断与 3′ -鸟苷酸残基相邻的核苷酸间磷酸二酯键，中间形成具 2′， 3′ -cGMP和以 2′， 3′ -cGMP为末端的寡核苷酸，随之进行不可逆的解而产生以 3′ -GMP和以 3′ -GMP为末端的寡核苷酸。自从 R． W． Holley等人用此酶决定 tRNA的核苷酸排列以来，它成为
RNase A/T1 mapping provides a sensitive and quantitative method of expression analysis of known gene sequences. It differs from primer-derived analyses such as primer extension and reverse transcriptase-PCR by the use of a probe
相关专题 RNA酶T1为一内切核糖核酸酶 。它特异地作用于鸟嘌呤核苷酸3"端磷酸并切割与相邻核苷酸相连的磷酸二酯键。反应的终产物为鸟嘌呤核苷3"磷酸及末端带鸟嘌呤核苷3"磷酸的寡核苷酸(Davidson 1972)。 用途 去除DNA-RNA杂交体中未杂交的RNA区。
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