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- 文献和实验
- 技术资料
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● -20°C to -70°C for 12 months in lyophilized state; ● -70°C for 3 months under sterile conditions after reconstitution.For long term storage, the product should be stored at lyophilized state at -20°C or lower.
- 英文名:
Human LAIR1 / CD305 Protein, His Tag
- 库存:
1///2
- 供应商:
ACROBiosystems
- 规格:
100ug/1mg
| 规格: | 100ug | 产品价格: | ¥3860.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1mg | 产品价格: | ¥23100.0 |
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文献和实验不同的表达系统,最常用的有大肠杆菌、哺乳动物细胞、酵母、昆虫细胞或是植物细胞等。但若使用哺乳动物细胞来表达目的蛋白,His-tag 则不适宜,因为系统中的组氨酸会干扰其纯化表现,其他的生产商也不建议这样的使用方式 。而 Strep-tag® 系统则与这些表达系统都能互相搭配,见下图实验数据: 图 2 全方位的蛋白质研究平台:从纯化到固定分析 除了用来生产高纯度的蛋白,Strep-Tactin® XT 与 Twin-Strep-tag® 间的高亲和力更能利用来稳定的固定目标蛋白,以进行蛋白
设计应遵循以下两点: 在C-端加入标签 使用长标签或者引入一段linker 由于膜蛋白 N 端信号肽的存在,标签只能加在 C 端。8—10 个组氨酸标签能够提高膜蛋白的结合强度,进而提高收率。 有时可以采取快速的方法进行第一步亲和层析。在细胞破碎阶段,直接加入去垢剂来溶解膜蛋白(不需要提前分离细胞膜),通过此法得到的上清可直接用 HisTrap FF crude 预装柱进行纯化,缩短实验时间。 分子筛 vS 离子交换 亲和层析之后,往往使用分子筛做最后的精纯,但如果杂质依然很多或者膜蛋白
酶切位点。 标签设计应遵循以下两点: 在 C-端加入标签 使用长标签或者引入一段 linker 由于膜蛋白 N 端信号肽的存在,标签只能加在 C 端。8-10 个组氨酸标签能够提高膜蛋白的结合强度,进而提高收率。 有时可以采取快速的方法进行第一步亲和层析。在细胞破碎阶段,直接加入去垢剂来溶解膜蛋白(不需要提前分离细胞膜),通过此法得到的上清可直接用 HisTrap FF crude 预装柱进行纯化,缩短实验时间。 分子筛 vs 离子
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