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- 2025年12月17日
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![(11bR)-4-羟基-2,6-二[4-(三氟甲基)苯基]-二萘并[2,1-d:1',2'-f][1,3,2]二氧杂磷杂卓 4-氧化物 （CAS:791616-59-6)](https://img1.dxycdn.com/p/s14/2025/1128/999/0466102372571524991.jpg!wh200)
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- 英文名：
Kushenol E
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50
- 供应商：
北京沃比森科技有限公司
- CAS号：
99119-72-9
- 规格：
5mg
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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体，酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞（按照转染试剂的说明书走），确保转染效率> 70
CRISPR-Cas9 全程实操教程：从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
基本原理CRISPR-Cas9 是一种细菌获得性免疫，用于降解入侵的外源 DNA。CRISPR RNA (crRNA) 与转录激活 crRNA (Trans-activating crRNA， tracrRNA) 退火形成的复合物能特异性识别与其互补的基因组序列，引导 Cas9 核酸内切酶在目的片段生成 DNA 双链断裂，如下图所示。通过基因工程手段对 crRNA 和 tracrRNA 进行改造，将其连接在一起得到 sgRNA (single guide RNA)。通过将表达 sgRNA
transfection. Maintain the cells for another 72 hto allow suffi cient time for HR mediated by CRISPR-Cas9 systemand the template. 3.5 Verifi cation and Quantifi cation of HR Effi ciency To verify the homologous recombination between the HR
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