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- Sino Biological
- 北京
- HG16589-NF
- 2025年12月08日
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- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Human DDX3X expression plasmid,N-Flag
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：DDX3X
反应种属：Human
GeneBank ID：NM_001356.4
序列长度：2028
载体：pCMV3-N-FLAG
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human DEAD (Asp-Glu-Ala-Asp) box helicase 3, X-linked with N terminal Flag tag.
标签序列：FLAG Tag Sequence: GATTACAAGGATGACGACGATAAGHindIII + NotI(6kb+2.03kb)
质粒：pCMV3-Flag-DDX3X
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文献和实验施一公团队又出新作！进一步解析人类 U2 snRNP 组装过程，提供癌症突变机制新见解
结果 样品制备及结构测定 首先，研究人员纯化了 DDX42-SF3b 复合物以及含有 DDX42 的潜在剪接体复合体。在 DDX42 的 N 端融合了一个 Flag 标记，并利用该标记对内源性复合体进行亲和选择。纯化后的样品在交联条件下进行梯度离心。最终样本只包含 5 种 snRNA 中的 U2。经过 2D 和 3D 分析，人类 DDX42-U2 复合体最终被重建，平均分辨率为 2.7 Å。 使用类似的策略，他们在 DHX15 上使用 Flag 标签拉下内生剪接复合物。经过亲和选择和梯度
会怎样"用 CRISPRa。 --- 一、机制差异决定了两者能回答的问题不同 过表达质粒（cDNA / ORF） 外源启动子（CMV、EF1α 等）驱动，表达量与内源调控完全脱钩； 通常只包含单一 CDS，不含内含子和 UTR； 表达量可达到内源的几十到几百倍； 可携带标签（FLAG、HA、GFP）方便检测。 CRISPRa（dCas9-VP64 / VPR / SAM / SunTag） 失活 Cas9（dCas9）融合转录激活域，被 gRNA 引导至靶基因启动子区； 激活的是内源位点，转录本包含完整的内含
）时。这有助于研究低丰度蛋白质和优化难以表达的蛋白质项目。它也是一个很好的纯化标签。FLAG 序列还含有肠激酶切割位点，如果标签位于 N 端，切除后不留多余的残基。谷胱甘肽 S - 转移酶（GST）GST 是最早被使用的表位标签之一；它可以置于 N 或 C 端并可以蛋白质的可溶表达。用谷胱甘肽结合树脂进行纯化。绿色荧光蛋白（GFP）在表位标签中独一无二，GFP 是一种自发荧光的 27 kDa 标签，可通过荧光显微镜直接在活细胞中检测到。血凝素 A（HA）HA 来自流感血凝素蛋白的结合结构域，含有高
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