小鼠CD3/CD28T细胞激活剂

本产品用于激活小鼠T细胞，促进T细胞增值和T细胞分化。该产品利用三维立体磁珠模拟抗原呈递细胞对T细胞的激活，ActBeads TM提供的第一信号（CD3）和第二信号（CD28）使得T细胞高效扩增，避免T耗竭。

– ActBeads TM激活磁珠浓度为4x107个/mL。

– 磁珠粒径均一，流式细胞仪分析时可与T细胞明显区分

一、产品规格

200 μL (AM2001S)

1 mL    (AM2001M)

2 mL    (AM2001L)

二、培养条件

– 缓冲液：RPMI1640 培养基+10% FBS + 2mM L-Glutamine+100 U/mL penicillin/streptomycin

– 细胞因子：人或者小鼠的IL2

温馨提示

– hIL2在人和小鼠细胞中具有同等活力

– 小鼠T细胞分离时，确保FACS Buffer渗透压稳定，小鼠免疫细胞非常敏感

– IL7、IL15可与IL2联合使用，促进T细胞增值

三、试剂盒组分

BSA - bovine serum albumin; 

PBS - phosphate-buffered saline

运输条件：4°C运输

四、操作步骤

激活或者扩增小鼠T细胞

1.分离小鼠T细胞，将其铺到96孔平底板中，细胞密度为8 x 104/孔，培养基200 μL 。

2.ActBeads TM小鼠CD3/CD28激活磁珠震荡混匀后，加入到细胞中，2 μL/孔

Note: 激活T细胞时，ActBeads TM和细胞比例为1:1；诱导Treg细胞分化时，磁珠和细胞的比例应增加到2:1。

3.加入IL2细胞因子，终浓度为100 U/mL。

4.二氧化碳细胞培养箱进行T细胞培养，5% 二氧化碳，37℃。

5.培养48-72小时后，T细胞体积变大，形态多样。

6.当细胞密度较高时，更换新鲜培养基或者将细胞转移至新的培养板。

T细胞重新刺激

通常T细胞在扩增到第7-10天时，需要通过添加新鲜的ActBeads TM和IL-2进行多次重新刺激。经过反复重新刺激后，CD8+ T细胞仍保持细胞毒性。

1.将T细胞重悬后置于无菌离心管中，在磁力架上吸附2分钟。

2.倒出/吸出T细胞，进行细胞计数。

3.将T细胞重新铺到培养板中，密度0.5–1 × 106 cells/mL。

4.二氧化碳细胞培养箱培养，5% 二氧化碳，37℃。

 

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