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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温 真空环境
- 英文名:
3-Methyl-1H-indazole
- 库存:
50
- 供应商:
北京沃比森科技有限公司
- CAS号:
3176-62-3
- 规格:
1g/5g/25g/10g/250mg
| 规格: | 1g | 产品价格: | ¥154.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 5g | 产品价格: | ¥531.0 |
| 规格: | 25g | 产品价格: | ¥1918.0 |
| 规格: | 10g | 产品价格: | ¥913.0 |
| 规格: | 250mg | 产品价格: | ¥88.0 |
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文献和实验CRISPR/Cas9 系统作为细菌和古细菌的获得性免疫系统, 通过 RNA 介导特异性的切割外源遗传物质, 用以对抗入侵的病毒和质粒。利用 Cas9 来摧毁入侵 DNA 的 Type Ⅱ CRISPR/Cas 系统, 可以在体外进行基因的编辑。为了提高CRISPR/Cas9 的特异性,使用 Cas9 切口酶和一对 sgRNA,两个相近的切口造成 DNA 双链断裂, 诱导细胞发生非同源末端连接修复, 造成目的基因的突变。利用 CRISPR/Cas9 进行基因的编辑,首先要构建有效的 sgRNA
的PAGlonm室温孵育1h,或37℃孵育30min.(9)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗10min.(10)1%戊二醛洗10min.(11)双蒸水洗5min.(12)1%明胶洗5min.(13)银避光显影8~15min.(14)双蒸水洗15min.(15)固定:用显影定影液(1:4或1:10)固定5min,也可以用15%硫酸钠-20%硫代硫酸钠混合液固定1~3min,或用1%戊二醛固定5min,50℃温水洗3~6min. (16)衬染,核固红衬染3min或甲基绿衬染3min. (17)常规
.(2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min,或抗原修复20min(98℃),自然冷却至室温。(3)0.05mol/L(pH7.4) TBS洗3×3min.(4)1%EA(卵蛋白)15min,不洗。(5)适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37C孵育30min.(6)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×5min.(7)0.02mol/L(pH7.4)TBS(内含0.1%BSA)洗10min.(8)1%EA 15min,不洗,滴加PAGlonm 1:40稀释,室温1h,(9)0.05mo!/L(pH
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