5-碘-1-甲基-1H-咪唑 （CAS：71759-88-1

B12辅酶 B12 coenzyme

也可用辅酶型维生素B 12 、辅酶 B 12 等词来表示。是由 5- 脱氧腺苷基取代氰钴胺素（ CN － B 12 ）中与钴连接的 CN 基而生成的，所以亦称钴胺酰胺辅酶。其中大多数是核苷酸中的碱基为 5 ， 6- 二甲（基）苯并咪唑的二甲（基）苯并咪唑钴酰胺辅酶（ dimeth － ylbenzimidazole cobamide coenzyme ）和钴胺素辅酶，但也有碱基为腺嘌呤或 5- 羟基苯并咪唑所置换的 B 12 辅酶。 B 12 辅酶是 H.Barker 等在研

专家点评：双向电泳中常犯的六大错误

C左右，然后加入碘乙酰胺。通常我们在100 μl样品中加入10 μl 20%(w/v)的碘乙酰胺水溶液，并在室温下孵育30分钟。 通过这一步，我们可以获得更为锐利的条带，并排除了一些假象，如两条带、其他的高分子量条带、点样孔中的沉淀，以及凝胶上的线。 4. SDS电泳中运行缓冲液的滴定 到目前为止，大部分单向和双向SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用是在基于Lämmli的不连续缓冲液系统中开展的[1]。其他基于磷酸盐、咪唑或其他缓冲液的均一系统表现

微管蛋白的可溶性表达及纯化

mM咪唑）悬浮，100ml用5~10ml缓冲液（约当2~5ml每克菌量），视悬浮后的菌液浓度而定；5、反复冻融法破碎细胞：做到14步时由于时间原因不能立即继续后面的操作，可将菌悬液放于-70℃冰箱中冷冻；也可用反复冻融的方法来破碎细胞，在-70℃冻融，在室温下溶解，反复冻融3~4次；6、加Lysozyme至1mg/ml（1ml加10ul），在冰上孵育30min~1h；7、200~300W超声破碎，2s×30次，停顿2s；若菌种较多可以增加破碎次数。注意超声破碎时间，不可太长，否则温度升高易导致蛋白