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- ATCC,DSMZ, ECACC, RIKEN
- ZK-0050890
- 中国、美国、日本
- 2025年11月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
细胞系
- ATCC Number：
见 说 明 书
- 细胞类型：
见 说 明 书
- 肿瘤类型：
见 说 明 书
- 供应商：
上海再康生物科技有限公司
- 库存：
T25培养瓶，1×106cells
- 生长状态：
贴壁
- 年限：
长久
- 运输方式：
常温运输或干冰运输
- 器官来源：
见 说 明 书
- 是否是肿瘤细胞：
见 说 明 书
- 细胞形态：
成纤维细胞样
- 免疫类型：
见 说 明 书
- 物种来源：
小鼠
- 相关疾病：
见 说 明 书
- 组织来源：
小鼠
- 规格：
T25培养瓶，1×106cells
细胞名称：小鼠成纤维细胞；L929
物种：小鼠
规格：T25培养瓶，1×106cells
形态特征：成纤维细胞样
生长特性：贴壁
描述
亲本L的亚克隆，是最早建立的连续培养物之一，L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。APRT+，HPRT+。
培养条件：MEM/DMEM-H 10% HS（前者为ATCC推荐，后者为本实验室使用之培养基）
传代方法：1:2-1:8传代，2-3天换液一次。
规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶特点：细胞代数为2-3代
包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋； 说 明 书
细胞来源：ATCC
货期：1-2周
运输方式：快递运输
L929细胞售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员，我们将尽快为您解决。
L929细胞培养需要注意哪些问题
其实，刚刚复苏的细胞就像是刚刚出生的baby，非常脆弱，需要各位小伙伴的细心呵护，不然，细胞就会被我们花样玩死。为了避免细胞不明不白的挂掉，我们就要对细胞的各种习性了如指掌。1. 俗语道，到什么山上唱什么歌，不同细胞用不同的培养液。此时，就不得不提起培养基里的“四大金刚”—MEM、DMEM、1640、F-12，它们基本参与了90%以上种类细胞的培养过程。MEM能力非常全面，号称是应用最广泛的细胞培养液。DMEM作浓度要高出2~4倍，可分为高糖型（含葡萄糖4500mg/L）和低糖型（含葡萄糖1000mg/L）。1640营养成分比较简单，比DMEM少一点糖和谷光甘肽，常用于淋巴细胞的培养。F12常用来支持CHO、Hela和L－细胞生长以及原代大鼠肝细胞和前列腺上皮细胞的培养。MEM和F12这两种培养基各取1/2，即可形成神经生物学最通用的培养基。在此，奉送一个不同细胞系对应的不同培养液的图，供大家参考。
| 细胞名称 | 细胞类型 | 物种 | 来源组织 | 培养液与血清 |
| 293 | 成纤维细胞 | 人 | 胚胎肾 | MEM,10%马血清 |
| 3T6 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM，10%FBS |
| A549 | 上皮样 | 人 | 肺癌 | F-12K,10%FBS |
| A9 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 结缔组织 | DMEM，10%FBS |
| AtT-20 | 上皮样 | 小鼠 | 肿瘤 | F-10，15%马血清+2.5%FBS |
| BALB/3T3 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM，10%FBS |
| BHK-21 | 成纤维细胞 | 仓鼠 | 肾 | DMEM，10%FBS or MEM,10%FBS and NEAA |
| BHL-100 | 上皮样 | 人 | 乳腺 | McCoy,sA,10%FBS |
| BT | 成纤维细胞 | 牛 | 鼻甲细胞 | MEM,10%FBS and NEAA |
| Caco-2 | 上皮样 | 人 | 结肠腺瘤 | MEM,20%FBS and NEAA |
| Chang | 上皮样 | 人 | 肝 | BEM，,10%牛血清 |
3. 当培养的贴壁细胞形态不好时，可在传代时，先倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清都可以）洗涤一次，用滴管吸走，再加入3ml培养基，沿着瓶底轻轻吹打一遍，然后吸走。这时在正式进行消化、吹打。其次，把吹打下的细胞悬液加入到含有新培养基的培养瓶内，置于培养箱里培养，按时间点观察细胞贴壁情况（10min，20min，30min）。而后迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次，然后加入完全培养基培养并观察细胞生长情况以及形态。直至找到细胞完美的形态为止。
4. 至于在培养瓶中加入多少培养基量，则是需要实验汪们自己去摸索的。对于生长快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基，细胞形态会更好，但是要注意对换液时间的把握。
5. 如何选择培养瓶。一般，生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，那么采用塑料瓶会比玻璃瓶的效果好；生长速度快的细胞，用玻璃瓶培养的效果会更好。因此，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候（比如细胞刚复苏时或者原代培养），塑料瓶会好一点；而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
6. 细胞冻存时，盖子要拧紧，不然复苏水浴时会渗水，造成细胞污染。因而冻存管要选择原配的管子和盖子（不同牌子、型号的管子会有差别），盖子拧紧后最好用封口膜封住。且每支冻存管都要标上细胞的名称、冻存时间，并记录在册，以免后续复苏细胞时，取错细胞。
7. 细胞冻存时要严格进行梯度降温（-4℃→-20℃~-40℃→-80℃→液氮）。要知道冰火两重天的生活环境只会让娇弱的细胞自爆身亡，谨记：缓降温！但如果真心赶时间时，可以使用细胞冻存盒进行细胞冻存，而后尽快将其转入液氮中。此外，要定期测量液氮罐里的液氮储备，以保证细胞全部浸在液面下。
8. 细胞解冻时，由于冻存管管壁较厚、隔热，而导致水浴时间太长（2min还没融化）时，可以将水浴锅的温度调至40℃左右，可以缩短解冻时间。
9. 提前预定超净台，减少复苏后插在冰盒里等待的时间，可避免细胞房人满为患，超净台使用紧张，复苏1h后，还没有加入新的培养液。（高浓度DMSO防止胞内形成冰晶，冻存时保护细胞，但复苏融解后，浸泡时间太久会对细胞有毒性）10. 复苏细胞时一定要有耐心，因为有些细胞在复苏一星期后才会真正有起色。因而，尽管细胞在复苏三四天后没有任何动静，也不要轻易倒掉所有细胞，要耐心等待，两周后再做决定。
11. 有关DMSO的一些注意事项：(1) DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，降低冰点、延缓冻存过程，同时提高细胞内的离子浓度、减少细胞内冰晶的形成，从而减少细胞损伤程度。(2) DMSO在溶解过程中会放热，应先与培养基混匀后再加血清，同时冻存液最好提前配置，DMSO现配对细胞的毒性可能更大；(3) 复苏时，要离心去除DMSO，并用新鲜的培养基洗涤1-2次，注意离心的时候速度不要太快。
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文献和实验头一次自己培养L929细胞，手忙脚乱的，把冷冻的细胞直接放进培养基里就结束了。过了60个小时，去显微镜下看，只能看到几个帖壁细胞。仔细想想做实验的步骤，又上网查查帖子，觉得可能是没有在第二天换新培养基的问题，导致冷冻液里的DMSO影响细胞贴壁。不知道培养皿里的细胞还有没有活下去的可能。总之第一次做实验结果不好也不应该轻易放弃。 把培养皿里的上清液转移到离心管里，离心，加入新的培养基重新放到培养箱里培养，原来的培养皿除掉上清液后直接加入新的培养基，因为里面
问：复苏后的L929培养第三天出现如图所示的情况，细胞形态不好，而且看上去细胞底层有层模糊的东西，电镜下观察有成块的黑点出现。是什么原因呢？另：培养液偏碱。 答：细胞看上去处于亚健康状态： 1、可能由于培养瓶不干净，而造成细胞底层模糊，而造成的污染； 2、成块的黑点出现可能由于刚复苏出来的细胞部分死亡而聚集成的死细胞团； 3、可能由于细胞在冻存时或是复苏时发生了污染，例如培养基的污染，胰酶的污染，传代等操作不当造成的污染；
L929 细胞增殖MTT比色法检测IL-1的生物活性 【基本原理】 IL-1具有刺激多种来源的成纤维细胞增殖的作用，可用于IL-1生物活性检测。目前国内外大多数实验室常用L929细胞株（小鼠成纤维细胞瘤细胞）作为检测IL-1生物活性的靶细胞或反应细胞。MTT比色法的原理是利用四甲基偶氮唑盐[3-（4.5-dimethylthiazol-2-yl）-2，5-diphenyl tetrazolium bromide，MTT]在活细胞线粒体的琥珀酸脱氢酶作用
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