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- ATCC,DSMZ, ECACC, RIKEN
- ZK-0050746
- 中国、美国、日本
- 2025年11月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
细胞系
- ATCC Number：
见 说 明 书
- 细胞类型：
见 说 明 书
- 肿瘤类型：
见 说 明 书
- 供应商：
上海再康生物科技有限公司
- 库存：
T25培养瓶，1×106cells
- 生长状态：
贴壁
- 年限：
长久
- 运输方式：
常温运输或干冰运输
- 器官来源：
见 说 明 书
- 是否是肿瘤细胞：
见 说 明 书
- 细胞形态：
人脑星形胶质细胞瘤细胞
- 免疫类型：
见 说 明 书
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
见 说 明 书
- 组织来源：
人
- 规格：
T25培养瓶，1×106cells
细胞名称：人脑星形胶质细胞瘤细胞；LN-464
规格：T25培养瓶，1×106cells
形态特征：人脑星形胶质细胞瘤细胞
生长特性：贴壁
描述
该细胞来源于一位67岁男性患者，癌组织位于右侧颅顶骨和枕骨部。该细胞携带p53（113位，TTC（Phe）→TCC（Ser））突变，及PTEN的183位碱基插入移码突变（AAG→AAAG）。P16及p14ARF为野生型。裸鼠中可成瘤。
培养条件： DMEM-H 10%FBS
传代方法： 1:4-1:6传代。每周换液2~3次。。
STR位点信息：
STR Profile AMEL CSF1PO D13S317 D16S539 D5S818 D7S820 TH01 TPOX vWA
LN-464 X 11 11,13 11 12 10,13 9 9,12 14,17,18
规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点：细胞代数为2-3代
包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋； 说 明 书
细胞来源：ATCC
货期：1-2周
运输方式：快递运输
LN-464细胞售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员，我们将尽快为您解决。
LN-464细胞培养需要注意哪些问题
其实，刚刚复苏的细胞就像是刚刚出生的baby，非常脆弱，需要各位小伙伴的细心呵护，不然，细胞就会被我们花样玩死。为了避免细胞不明不白的挂掉，我们就要对细胞的各种习性了如指掌。1. 俗语道，到什么山上唱什么歌，不同细胞用不同的培养液。此时，就不得不提起培养基里的“四大金刚”—MEM、DMEM、1640、F-12，它们基本参与了90%以上种类细胞的培养过程。MEM能力非常全面，号称是应用最广泛的细胞培养液。DMEM作浓度要高出2~4倍，可分为高糖型（含葡萄糖4500mg/L）和低糖型（含葡萄糖1000mg/L）。1640营养成分比较简单，比DMEM少一点糖和谷光甘肽，常用于淋巴细胞的培养。F12常用来支持CHO、Hela和L－细胞生长以及原代大鼠肝细胞和前列腺上皮细胞的培养。MEM和F12这两种培养基各取1/2，即可形成神经生物学最通用的培养基。在此，奉送一个不同细胞系对应的不同培养液的图，供大家参考。
| 细胞名称 | 细胞类型 | 物种 | 来源组织 | 培养液与血清 |
| 293 | 成纤维细胞 | 人 | 胚胎肾 | MEM,10%马血清 |
| 3T6 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM，10%FBS |
| A549 | 上皮样 | 人 | 肺癌 | F-12K,10%FBS |
| A9 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 结缔组织 | DMEM，10%FBS |
| AtT-20 | 上皮样 | 小鼠 | 肿瘤 | F-10，15%马血清+2.5%FBS |
| BALB/3T3 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM，10%FBS |
| BHK-21 | 成纤维细胞 | 仓鼠 | 肾 | DMEM，10%FBS or MEM,10%FBS and NEAA |
| BHL-100 | 上皮样 | 人 | 乳腺 | McCoy,sA,10%FBS |
| BT | 成纤维细胞 | 牛 | 鼻甲细胞 | MEM,10%FBS and NEAA |
| Caco-2 | 上皮样 | 人 | 结肠腺瘤 | MEM,20%FBS and NEAA |
| Chang | 上皮样 | 人 | 肝 | BEM，,10%牛血清 |
3. 当培养的贴壁细胞形态不好时，可在传代时，先倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清都可以）洗涤一次，用滴管吸走，再加入3ml培养基，沿着瓶底轻轻吹打一遍，然后吸走。这时在正式进行消化、吹打。其次，把吹打下的细胞悬液加入到含有新培养基的培养瓶内，置于培养箱里培养，按时间点观察细胞贴壁情况（10min，20min，30min）。而后迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次，然后加入完全培养基培养并观察细胞生长情况以及形态。直至找到细胞完美的形态为止。
4. 至于在培养瓶中加入多少培养基量，则是需要实验汪们自己去摸索的。对于生长快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基，细胞形态会更好，但是要注意对换液时间的把握。
5. 如何选择培养瓶。一般，生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，那么采用塑料瓶会比玻璃瓶的效果好；生长速度快的细胞，用玻璃瓶培养的效果会更好。因此，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候（比如细胞刚复苏时或者原代培养），塑料瓶会好一点；而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
6. 细胞冻存时，盖子要拧紧，不然复苏水浴时会渗水，造成细胞污染。因而冻存管要选择原配的管子和盖子（不同牌子、型号的管子会有差别），盖子拧紧后最好用封口膜封住。且每支冻存管都要标上细胞的名称、冻存时间，并记录在册，以免后续复苏细胞时，取错细胞。
7. 细胞冻存时要严格进行梯度降温（-4℃→-20℃~-40℃→-80℃→液氮）。要知道冰火两重天的生活环境只会让娇弱的细胞自爆身亡，谨记：缓降温！但如果真心赶时间时，可以使用细胞冻存盒进行细胞冻存，而后尽快将其转入液氮中。此外，要定期测量液氮罐里的液氮储备，以保证细胞全部浸在液面下。
8. 细胞解冻时，由于冻存管管壁较厚、隔热，而导致水浴时间太长（2min还没融化）时，可以将水浴锅的温度调至40℃左右，可以缩短解冻时间。
9. 提前预定超净台，减少复苏后插在冰盒里等待的时间，可避免细胞房人满为患，超净台使用紧张，复苏1h后，还没有加入新的培养液。（高浓度DMSO防止胞内形成冰晶，冻存时保护细胞，但复苏融解后，浸泡时间太久会对细胞有毒性）10. 复苏细胞时一定要有耐心，因为有些细胞在复苏一星期后才会真正有起色。因而，尽管细胞在复苏三四天后没有任何动静，也不要轻易倒掉所有细胞，要耐心等待，两周后再做决定。
11. 有关DMSO的一些注意事项：(1) DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，降低冰点、延缓冻存过程，同时提高细胞内的离子浓度、减少细胞内冰晶的形成，从而减少细胞损伤程度。(2) DMSO在溶解过程中会放热，应先与培养基混匀后再加血清，同时冻存液最好提前配置，DMSO现配对细胞的毒性可能更大；(3) 复苏时，要离心去除DMSO，并用新鲜的培养基洗涤1-2次，注意离心的时候速度不要太快。
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文献和实验基膜(basal lamina，basement membrane)
基膜是一种复合的细胞外结构, 是细胞外基质的特异区。典型的基膜厚约50nm,有些基膜的厚度达200nm。 通常会形成基膜的组织和细胞有: ①肌细胞和脂肪细胞的表面; ②上皮组织基底面的下方,如皮肤上皮的下表面,将上皮细胞与结缔组织分开;③血管内皮细胞的下表面。此外,在施旺细胞(Schwann cells)的表面也覆盖有基膜。 基膜是由不同的蛋白纤维组成的网状结构，主要成份有LN、Ⅳ型胶原、巢蛋白(entactin)、肌腱蛋白(tenascin)、钙结合
纤维化的进程。为此，准确地了解、把握LN的活动状态和肾组织已存在的纤维化状况甚为重要。肾脏病理检查对指导LN的治疗具有重要意义。肾脏病理上LN活动性指标（AI）有：（1）肾小球细胞增殖性改变；（2）纤维素性坏死和细胞核溶解；（3）细胞性新月体；（4）白金耳现象和玻璃样血栓；（5）肾小球中性粒细胞浸润；（6）肾间质单核细胞浸润。慢性化指标（CI）包括：（1）肾小球硬化；（2）纤维性新月体；（3）肾小管萎缩；（4）肾间质纤维化。LN的治疗原则为依据LN肾脏病理类型（WHO分类标准）选择不同
表面受体结合的结构域。正是这些独立的结合位点使LN作为一个桥梁分子，介导细胞同基膜结合。所以LN的主要功能就是作为基膜的主要结构成分对基膜的组装起关键作用, 在细胞表面形成网络结构并将细胞固定在基膜上。 LN还有许多其他的作用,如在细胞发育过程中刺激细胞粘着、细胞运动。LN还能够刺激胚胎中神经轴的生长,并促进成年动物的神经损伤后重生长和再生。如同纤粘连蛋白,细胞外的LN能够影响细胞的生长、迁移和分化。LN在原生殖细胞的迁移中起关键作用。
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