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- CQ80232
- SHANGHAI
- 2025年12月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
人
- ATCC Number：
详询
- 细胞类型：
科研
- 肿瘤类型：
无
- 供应商：
蒂科生物
- 库存：
株
- 英文名：
H9
- 生长状态：
圆形克隆，贴壁
- 年限：
永久
- 运输方式：
复苏发货或干冰冻存发货
- 器官来源：
人
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
具体见细胞说明书
- 免疫类型：
详询
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
无
- 组织来源：
人
- 规格：
T25
细胞系使用说明书
H9胚胎干细胞
| 细胞名称 |
H9胚胎干细胞 |
| 种属 |
人 |
| 细胞来源 |
上海市东方医院 |
| 生长特性 |
贴壁 球形克隆 |
| 培养条件 |
培养基：STEMCELL的mTSR1，人胚胎干细胞无饲养层培养基 温度：37℃ 气相：95%空气,5% CO2
|
| 传代 |
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，每次传代48h后一天换一次； 2.待细胞克隆还没开始融合时，需要对其进行传代，传代比例为1:4； 3传代步骤：将1 mg/mL胶原酶IV消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加2 ml预热好的胶原酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化，前30min观察一次，之后每15min观察一次）一般孵育30-60min左右，消化好后加入5ml完全培养基。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，置于15ml离心管中，待细胞自然沉降后将上层Collagenase-type IV吸除，加入hES完全培养液5 ml，吹打2-3次，待细胞自然沉降后将上层培养液吸除。再加入培养液重悬细胞传代。每次传代后48h内不要移动。 |
| 保存 |
冻存条件：60%完全培养基+30%FBS（ES级）+10%DMSO (备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：液氮存储 |
| 供应限制 |
仅供研究之用 |
| 常见问题及解决方案 |
1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。 |
（说明书仅供参考）
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luking2006 我用H9C2心肌细胞系做心脏的自噬研究，想请教细胞系传代次数多>30代，会对实验结果造成影响吗？看到有文献说细胞系传代多了会引起基因表达的改变。是这样吗？很急切，先谢谢大家了。我前期用传代多的细胞系做出的实验结果和大体的不一致，不知是不是这个原因。 anyi63 我们用的是h9c2细胞株，细胞系是细胞株50代以后遗传突变带癌细胞特点，有可能在培养条件下无限传下去 cxc11
1. 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。 2. 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15 ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除
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