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文献和实验大肠杆菌(Escherichia coli)是分子遗传学实验、基因工程操作中广泛采用的一种受体菌,它的遗传背景研究的比较详细,常用做寄主进行基因扩增及外源基因的表达。 一. 实验目的 : 掌握大肠杆菌的对照培养、单菌落的分离及菌种保存方法。 二. 实验原理 : 大肠杆菌除本身的核染色体外,往往还含有质粒(Plasmid)DNA,这是一种双链闭合环状
摘要:通过PCR,从E.coli K12 Y1090株系中扩增获得glgC基因,插入pUC19的PstI和SacI 位点之间,得到重组质粒pAGP。对所克隆的glgC基因进行全序列测定,结果表明,与已发表的序列相比,有7个核苷酸发生了改变,核苷酸顺序的同源性为99.4 %; 推导的氨基酸序列的同源性为99.2 %, 其中,第296位由赖氨酸变为谷氨酸。通过寡核苷酸介导的定点诱变,将第1007位核苷酸由G变为A,从而使第336位氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸,将此glgC的突变基因定
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