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再康生物
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常温运输,4℃保存
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250 mL
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文献和实验―赖氨酸―多聚甲醛(periodate-lysine-paraformaldehyde,PLP)液和2%多聚甲醛―0.5%戊二醛混合液。在包埋前染色中,PLP较为常用,该固定液较适用于含糖类丰富的组织,对超微结构及许多抗原活性保存较好。因为PLP中的过碘酸能氧化糖类,使其中的羟基转变为醛基,赖氨酸的双价氨基与醛基结合从而把抗原交联起来。因组织抗原绝大多数含蛋白质和糖类。而抗原表位一般位于蛋白部分。PLP能选择性地使糖类交联,这样既稳定了抗原,又不影响抗原表位与抗体的结合。加入低浓度的多聚甲醛则能稳定
或终止内源性或外源性细胞内分解酶的反应,防止组织细胞自溶,更是为了保存组织或细胞内的抗原性,使抗原不失活,不发生弥散。不同的抗原对固定液耐受程度不同,因而要选择合适的固定剂。 现在常用的固定剂有中性甲醛液,4% 多聚甲醛-磷酸盐缓冲液。有些固定剂对特殊组织有更好效果,如苦味酸对于头皮、指甲固定有软化效果,Helly 固定液对于胰岛和垂体效果较好,PLP 固定液对于含糖组织抗原保存更好。 脱水、石蜡包埋和制片 脱水用梯度乙醇(由低到高)充分脱水,对于一些易脆的组织(如肝、脾等)应减少高浓度酒精里
,为实验室常用固定剂之一。我们在应用中,常采用2.5%的多聚甲醛和30%的饱和苦味酸,以增加其对组织的穿透力和固定效果,保存更多的组织抗原。固定时间为6~18 h。 5、PLP液 PLP液即过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液(Periodate-Lysine-paraform-alde-hyde fixative) 试剂:过碘酸钠、赖氨酸盐酸盐(或盐酸赖氨酸)、多聚甲醛、蒸馏水。 配制方法: (1)贮存液A(0.1 mol/L赖氨酸-0.5mol/L Na3PO4,pH7.4):称取赖氨酸
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