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- 2025年11月21日
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文献和实验[ 实验目的 ] 通过本实验学习 PCR 反应的基本原理与实验技术。 通过本实验学习重组质粒的检测技术。 [ 基本原理 ] 聚合酶链反应（ polymerase chain reaction ， PCR ）是体外酶促合成特异 DNA 片段的一种技术。在待扩增的 DNA 片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后， DNA 扩增 2 n 倍。 PCR 进行的基本条件是： （ 1 ）以 DNA 为模板（在 RT － PCR 中模板是 RNA ）； （ 2 ）以寡核苷酸
遗传重组 genetic recombination 指分别来自两个亲本的基因连锁群间所产生的交换，形成两个亲本所没有的连锁群组合，产生具有重组性状的后代（重组体）的现象。因为真核生物是具有二套或二套以上的同源染色体的倍数体，所以一般在减数分裂形成生殖细胞时同源染色体之间会发生交叉从而出现重组；现在已知霉菌等在体细胞中也会发生重组。因为原核生物（病毒和细菌）是以单一的核酸为基因组的单倍体，因此如果进行杂交，两个亲本 DNA分子之间就会直接发生交换而形成重组体。不管哪一种情况
枪法(Biolistic-bombardment)(植物细胞) Transfer of T-DNA from Agrobacterium into a plant cell Regeneration of leaf disks infected by Agrobacterium DNA重组 外源基因插入与否可通过载体上的Lac Z基因进行初步的筛选。有外源基因插入的细菌呈白斑，无外源基因插入的细菌呈蓝斑
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