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文献和实验相关专题 蛋白纯化技术专题 DTT( 二硫苏糖醇)是实验室常用的还原试剂,常被用于蛋白质保存以及蛋白二硫键的还原。DTT的入特点是极易被氧化,稳定性较差,一般DTT常保存于-20度中可以长达数年。 DTT是一种很强的还原剂,其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。 DTT特点与DDT的保存 DTT是一种常用还原剂,有抗氧化作用,进口
培养级), 金标级牛血清白蛋白, 交联牛血清白蛋白。 二、各等级BSA说明 1、 等级最低的BSA,这个是普通意义上的BSA,只要主要成分是BSA的产品都可以成为牛血清白蛋白,所以他也涵盖了其他等级的BSA,所以客户要注意其纯度。 作用:一般是工业生产用。 2、 牛血清白蛋白
液的 pH、盐离子浓度、添加剂(如 5% 甘油、1mM DTT) 等。 原因三 HIS 标签没有表达或丢失或暴露不充分。 建议 1 用 anti-HIS 的抗体进行 WB,检测 HIS 标签是否存在。 建议 2 将蛋白用 4-6M 盐酸胍或 4-8M 尿素变性后,让 HIS 标签充分暴露出来,看是否能与填料结合。 建议 3 改变 HIS 标签的位置或者增加其数目(常用 6-12 个 HIS),增加暴露和结合机会。 建议 4 改变金属结合离子,除了 Ni2+,Cu2+、Zn2+、Co2+ 也可以用来进
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