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文献和实验固相pH梯度等电聚焦是80年代建立起来的一种等电聚焦技术,其所用的介质是一些具有弱酸或弱碱性质的丙稀酰胺衍生物,它们于丙稀酰胺和甲叉双丙稀酰胺有相似的聚合行为。固定化电解质一端的双键可以在聚合中共价结合到聚丙烯酰胺介质中,其另一端的R集团为弱酸或弱碱,可在聚合物中形成弱酸或弱碱的缓冲体系,利用缓冲体系滴定终点附近一段pH范围就可行成近似线性的pH梯度。所以固相pH梯度与载体两性电解质pH梯度的区别在于前者的分子不是两性分子,在凝胶聚合时候便形成pH梯度,不随环境电场条件的改变而改变,后者是两性
Western Blot详解-主要试剂 主要试剂 1、 丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺,应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N,N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g,N,N-亚甲叉双丙稀酰胺1g,加H2O至100ml。)储于棕色瓶,4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.0,因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月,隔几个月须重新配制。如有沉淀,可以过滤。 2、 十二烷基硫酸钠SDS溶液:10%(w/v
主要试剂 1、 丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺,应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N,N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g,N,N-亚甲叉双丙稀酰胺1g,加H2O至100ml。)储于棕色瓶,4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.0,因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月,隔几个月须重新配制。如有沉淀,可以过滤。 2、 十二烷基硫酸钠SDS溶液:10%(w/v)0.1gSDS
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