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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
60
- 英文名:
pKNOCK-Km
- 保质期:
三年
- 供应商:
再康生物
- 保存条件:
常温
基本信息
| 质粒类型: | 原核表达载体载体 |
|---|---|
| 载体大小: | 2098 bp (查看载体序列) |
| 载体抗性: | Kanamycin |
| 备注: | low copy number in pir+ E. coli strains high copy number in pir116 E. coli strains |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| ZK8078 | pKNOCK-Km | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验型石油酵母Y11430突变 而来,常用的3株宿主菌是GS115,KM71 和 MC1o0-3。GS115和KM71是Y1 1430的组氨醇脱氢酶基因(histidinol dehydrogenase gene,h/s4)缺失突变体,不能合成 H/s4,因此质粒载体需携带h/s4,转染后的阳性重组子可以用h/s4缺陷 (h/s4-)平板进行筛选,但是GS115和KM71存在一定的低频率自发回变,即重新变为h/s正常菌株,致使h/s4’平板筛选阳性重组子存在假阳性情况。GS115的启动子为P,在含甲
室完成。 1.2 农杆菌菌株 大肠杆菌DH5α为受体菌,克隆质粒为PUC19,植物表达载体为PROKⅡ,根癌农杆菌菌株LBA4404,由中国科学院北京微生物所提供。具有ACC脱氨酶基因,长度为1kb,位于表达载体pROKⅡ35s上。 1.3 实验方法 1.3.1 哈密瓜无菌苗的获得 分别取皇后、伽师瓜种子去皮,70%的酒精溶液浸泡1min,再用0.1%的升汞溶液消毒6~
我先说我有的质粒和菌株:PPIC9K,PPIC9,PPICZahphaA,B,C 以及一个改造的PPIC9K载体,EcoRI和BamHI双酶切,C末端引入了一个6histag 菌株:GS115,KM71,X33,以及十几个空载体对照菌株 我的酵母表达Protocol: >10ug质粒用Sal线性化,加1/10体积的3M NaAC PH5.2和3倍体积的乙醇沉淀 70%乙醇洗一遍,20ul ddH2O重溶 按照公司手册做电转化感受态,一般OD
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