- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
pAdEasy-2
- 保质期:
1年
- 供应商:
再康生物
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
质粒编号:
质粒名称: pAdEasy-2
其他名称:
质粒大小(bp): 30808
抗性:Ampicillin (氨苄 青 霉 素)
质粒类型:腺病毒载体
是否病毒:
启动子:
稳转或瞬转:
组成型或诱导性:
表达水平: low
蛋白标签:
测序引物:
GenBank号: AY370909
其他属性:
质粒图谱:
质粒序列:
>Author sequence
NNTTAATTAAGGATCCNNNCCTGTCCTCGACCGATGCCCTTGAGAGCCTTCAACCCAGTCAGCTCCTTCC
GGTGGGCGCGGGGCATGACTATCGTCGCCGCACTTATGACTGTCTTCTTTATCATGCAACTCGTAGGACA
GGTGCCGGCAGCGCTCTGGGTCATTTTCGGCGAGGACCGCTTTCGCTGGAGCGCGACGATGATCGGCCTG
TCGCTTGCGGTATTCGGAATCTTGCACGCCCTCGCTCAAGCCTTCGTCACTGGTCCCGCCACCAAACGTT
TCGGCGAGAAGCAGGCCATTATCGCCGGCATGGCGGCCGACGCGCTGGGCTACGTCTTGCTGGCGTTCGC
GACGCGAGGCTGGATGGCCTTCCCCATTATGATTCTTCTCGCTTCCGGCGGCATCGGGATGCCCGCGTTG
CAGGCCATGCTGTCCAGGCAGGTAGATGACGACCATCAGGGACAGCTTCAAGGATCGCTCGCGGCTCTTA
CCAGCCTAACTTCGATCACTGGACCGCTGATCGTCACGGCGATTTATGCCGCCTCGGCGAGCACATGGAA
CGGGTTGGCATGGATTGTAGGCGCCGCCCTATACCTTGTCTGCCTCCCCGCGTTGCGTCGCGGTGCATGG
AGCCGGGCCACCTCGACCTGAATGGAAGCCGGCGGCACCTCGCTAACGGATTCACCACTCCAAGAATTGG
AGCCAATCAATTCTTGCGGAGAACTGTGAATGCGCAAACCAACCCTTGGCAGAACATATCCATCGCGTCC
GCCATCTCCAGCAGCCGCACGCGGCGCATCTCGGGCAGCGTTGGGTCCTGGCCACGGGTGCGCATGATCG
TGCTCCTGTCGTTGAGGACCCGGCTAGGCTGGCGGGGTTGCCTTACTGGTTAGCAGAATGAATCACCGAT
ACGCGAGCGAACGTGAAGCGACTGCTGCTGCAAAACGTCTGCGACCTGAGCAACAACATGAATGGTCTTC
GGTTTCCGTGTTTCGTAAAGTCTGGAAACGCGGAAGTCAGCGCCCTGCACCATTATGTTCCGGATCTGCA
TCGCAGGATGCTGCTGGCTACCCTGTGGAACACCTACATCTGTATTAACGAAGCGCTGGCATTGACCCTG
AGTGATTTTTCTCTGGTCCCGCCGCATCCATACCGCCAGTTGTTTACCCTCACAACGTTCCAGTAACCGG
GCATGTTCATCATCAGTAACCCGTATCGTGAGCATCCTCTCTCGTTTCATCGGTATCATTACCCCCATGA
ACAGAAATTCCCCCTTACACGGAGGCATCAAGTGACCAAACAGGAAAAAACCGCCCTTAACATGGCCCGC
TTTATCAGAAGCCAGACATTAACGCTTCTGGAGAAACTCAACGAGCTGGACGCGGATGAACAGGCAGACA
TCTGTGAATCGCTTCACGACCACGCTGATGAGCTTTACCGCAGCTGCCTCGCGCGTTTCGGTGATGACGG
TGAAAACCTCTGACACATGCAGCTCCCGGAGACGGTCACAGCTTGTCTGTAAGCGGATGCCGGGAGCAGA
CAAGCCCGTCAGGGCGCGTCAGCGGGTGTTGGCGGGTGTCGGGGCGCAGCCATGACCCAGTCACGTAGCG
ATAGCGGAGTGTATACTGGCTTAACTATGCGGCATCAGAGCAGATTGTACTGAGAGTGCACCATATGCGG
TGTGAAATACCGCACAGATGCGTAAGGAGAAAATACCGCATCAGGCGCTCTTCCGCTTCCTCGCTCACTG
ACTCGCTGCGCTCGGTCGTTCGGCTGCGGCGAGCGGTATCAGCTCACTCAAAGGCGGTAATACGGTTATC
CACAGAATCAGGGGATAACGCAGGAAAGAACATGTGAGCAAAAGGCCAGCAAAAGGCCAGGAACCGTAAA
AAGGCCGCGTTGCTGGCGTTTTTCCATAGGCTCCGCCCCCCTGACGAGCATCACAAAAATCGACGCTCAA
GTCAGAGGTGGCGAAACCCGACAGGACTATAAAGATACCAGGCGTTTCCCCCTGGAAGCTCCCTCGTGCG
CTCTCCTGTTCCGACCCTGCCGCTTACCGGATACCTGTCCGCCTTTCTCCCTTCGGGAAGCGTGGCGCTT
TCTCAATGCTCACGCTGTAGGTATCTCAGTTCGGTGTAGGTCGTTCGCTCCAAGCTGGGCTGTGTGCACG
AACCCCCCGTTCAGCCCGACCGCTGCGCCTTATCCGGTAACTATCGTCTTGAGTCCAACCCGGTAAGACA
CGACTTATCGCCACTGGCAGCAGCCACTGGTAACAGGATTAGCAGAGCGAGGTATGTAGGCGGTGCTACA
GAGTTCTTGAAGTGGTGGCCTAACTACGGCTACACTAGAAGGACAGTATTTGGTATCTGCGCTCTGCTGA
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文献和实验2.5×1010个细胞/ml)。分装,-80℃或液氮保存待用。 2、病毒骨架质粒转化大肠杆菌,扩增,纯化。 3、将1-5ul (约1ug) 线性化的穿梭质粒及1ul(约100ng/ul)病毒骨架质粒(如pAdEasy-1)加入至含约40ul BJ5183电转感受态的EP管中混匀,冰上冷却。 4、将混合物加入电转杯,电击(1250-1500V/mm,5ms)。 5、电击结束取出样品,加入1ml SOC或LB培养液,37℃低速振荡40min。 6、取适当体积的电击转化细胞液涂于数个卡那霉素抗性
A Practical Guide for using the AdEasy System
, e.g. pAdTrack-CMV. The resultant plasmid is linearized by digesting with restriction endonuclease Pme I, and subsequently cotransformed into E. coli. BJ5183 cells with an adenoviral backbone plasmid, e.g. pAdEasy-1,. Recombinants are selected
(约1µg) 线性化的穿梭质粒及1µl(约100ng/µl)病毒骨架质粒(如pAdEasy-1)加入至含约40µl BJ5183电转感受态的EP管中混匀,冰上冷却。 4 将混合物加入电转杯,电击(1250-1500V/mm,5ms)。 5 电击结束取出样品,加入1ml SOC或LB培养液,37℃低速振荡40min。 6 取适当体积的电击转化细胞液涂于数个卡那霉素抗性平板(25-50mg/ml),37℃培养16-20hr。 7 次日挑取平板上长出的菌落(选择
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