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- 2025年11月20日
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- 文献和实验
- 技术资料
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10000
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海再康
- 保存条件：
室温保存
产品包装：试剂盒组成 D1800-50 D1800-100 储存条件
RNase A 1ml 2ml -20℃
蛋白酶K 1ml 2ml -20℃红细胞裂解液 120ml 120ml×2 RT
溶液A 15ml 2 5ml RT溶液B 15ml 25ml RT大提柱式DNA清除剂
漂洗液 15ml 15ml×2 RT洗脱液 15ml 30ml RT
吸附柱 50个 100个 RT收集管 50个 100个 RT 说 明 书 1份 1份 RT
注意事项：
1、本试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。
2、常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等，需注意的是，如欲制备大分子量血液基因组DNA，可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝，因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时，有PCR扩增抑制大提柱式DNA清除剂 现象。
3、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DN**段较小且提取量也下降。
4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响效果。
5、绝大多数哺乳动物的全血如人全血中的红细胞无核，故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞，以免影响白细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量减少为5-20ul，不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。
6、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul，体积过小会影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的 pH值调至此范围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率。
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文献和实验。 5. 粘稠的样品通常无法获得好结果 蛋白丢失：粘稠物包裹蛋白导致无法释放，样品很难跑出理想的结果，有时甚至是完全没有条带。 令人反感的粘稠「鼻涕」是怎么形成的？ 问题出在细胞裂解过程中，细胞中的 DNA 缠绕其他大分子物质，导致蛋白质聚集，再加上其他细胞碎片（如油脂、难溶蛋白等）共同形成粘稠的「鼻涕」状态，也被称为「核酸残团」。 核酸残团的存在大大降低了蛋白的提取效率，使得蛋白丢失，从而导致了 WB 实验中的一系列问题。曾有研究者用不同方法进行小鼠脾脏和肝
，即切胶的那次电泳中，如果切成的条带很清晰，不拖泥带水，没有弥散，没有拖尾，那做回收、连接效果最好。相反，若有弥散、拖尾、不清楚、一团亮等情况就是切的不好，做后续实验成功率会降低。若真是效果很差建议改进体系重新切。 回收 回收可以用柱式试剂盒或手工法。柱式回收试剂盒：此类试剂盒适合各种长度 DNA，对黏性末端基本没有破坏，回收效率也不错。手工醇沉淀法步骤如下，把切得的胶弄碎，用 Tris-HCl 浸泡一段时间，吸出所有的液体，用酚抽提一遍，氯仿抽提一遍，加盐和醇醇沉，沉淀
是柱式分离，如RNApure 因为操作简单，时间短，纯度高而受到大家的喜爱，RNApure不需要DNA酶消化DNA，节省了时间，避免RNA的降解，从而提高了产量；相对非柱式分离（如TRIZOL），去除蛋白及其他杂质干净，提高了纯度，对于细胞、组织、一般植物均非常适合。植物RNA的提取比较难抉择，植物RNA提取受酚、多糖、蛋白杂质、次生代谢物含量的影响，一般用TRIZOL提取纯度不高，而且很多植物用TRIZOL提取不出来。这时候可以选择多糖多酚植物总RNA提取试剂盒（水仙、辣椒、胡萝卜、玉米、百合
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