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柱式质粒小量提取试剂盒 DNA纯化

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月14日
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    • 保存条件

      室温

    • 保质期

      12个月

    • 英文名

      Plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)

    • 库存

      731

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 规格

      100次|200次

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括柱式质粒小量提取试剂盒 DNA纯化在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。


    名称:柱式质粒小量提取试剂盒 DNA纯化
    编号:ALH075
    规格:100次|200次
    英文名:Plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)
    本试剂盒适用于小规模质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

    试剂盒组份(100次):
    RNaseA(10mg/ml)————————250μl
    溶液P1—————————————25ml
    溶液P2—————————————25ml
    溶液P3—————————————35ml
    漂洗液WB————————————25ml
    洗脱缓冲液EB——————————15ml
    吸附柱和收集管(2ml)———————100套

    试剂盒特点:
    1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
    2.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好, 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

    注意事项
    1. 本试剂盒适用菌株为XL-1 Blue和DH5α等核酸酶含量低缺陷型菌株。所用菌株为JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株,核酸酶含量丰富,应购买本公司生产的高纯度质粒小量快速提取试剂盒。
    2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
    3. 溶液P3中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
    4. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒,建议接种单菌落于1.5~4.5ml加合适抗生素的LB培养基, 过夜培养14~16个小时,可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应适当加大菌体使用量,使用5~10ml过夜培养物,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,其它步骤相同。
    5. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
    6. 质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
    7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。

    储存条件:室温,有效期12个月。

    本品别名:柱式质粒小量提取试剂盒|小量质粒制备试剂盒|小量质粒提取试剂盒|质粒小量制备试剂盒

    欲了解更多柱式质粒小量提取试剂盒 DNA纯化的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:

    ·hoeschst凋亡小体染色试剂盒
    编号:ALH160
    英文名称:Hoeschst apoptotic body Stain Kit
    规格:100次
    本试剂盒Hoechst染料紫外光激发波长350-370 nm;发射波长465 nm,在荧光显微镜下DNA发出蓝色荧光。凋亡中晚期细胞形态学变化为染色质在局部区域凝集,固缩,继而核碎裂出现凋亡小体。在Hoeschst染色下,细胞核或者凋亡小体的DNA会呈现致密浓染或者碎块状致密浓染。

    试剂盒组份:
    固定液———————————50ml
    100×染色浓缩液——————0.5ml
    染色稀释缓冲液———————50ml

    注意事项
    1.需可以观察蓝色荧光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
    2.需PBS或0.9%NaCl溶液,盖玻片与载玻片。
    3.荧光容易淬灭,应该尽量避光操作和保存。

    储存条件:4℃,有效期半年。

    ·病毒DNA提取试剂盒
    编号:ALH172
    英文名称:Viral genomic DNA rapid extraction kit
    规格:50次
    本试剂盒采用特异性结合病毒DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,病毒DNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA。该产品可以满足绝大多数的病毒DNA的提取要求,如病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。病毒裂解后,DNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR、酶切、杂交等分析。

    试剂盒组份(50次):
    裂解液DLB—————————20ml
    去蛋白液RE————————25ml
    漂洗液WB—————————15ml
    洗脱缓冲液EB———————15ml
    吸附柱AC—————————50个
    收集管(2ml)————————50个

    产品特点:
    1.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
    2.节省时间,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
    3.多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种操作,包括PCR、酶切、杂交等。

    操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
    提示:第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入60ml无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
    1.200μl血清等体液(需回复到室温,不足可用0.9%NaCl或者PBS补足)转入上述1.5ml离心管,加入400μl裂解液DLB,立刻涡旋振荡充分混匀。
    2.室温(15-25℃)放置10分钟,每隔5分钟,振荡混匀一次。
    3.加入450μl无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀。如果周围环境高于25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入。
    4.将上述混合物加入一个吸附柱AC中,(吸附柱放入收集管中)13000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液。如果总体积超过750μl,可分两次将溶液加入同一个吸附柱AC中。
    5.加500μl去蛋白液RE,12000rpm离心30秒,弃废液。
    6.加入500μl漂洗液WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12000rpm离心30秒,弃废液,加入500μl漂洗液WB,重复一遍。
    7.将吸附柱AC放回空收集管中,13000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
    8.取出吸附柱AC,放入一个新的离心管中,在吸附膜的中间部位加30-50μl洗脱缓冲液EB(事先在65-70℃水浴中加热效果更好),室温放置1分钟,12,000rpm离心1分钟。如果想得到较多量的DNA,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,12,000rpm离心1分钟。洗脱体积越大,洗脱效率越高。如果需要DNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积,但是最小体积不应少于20μl,体积过小降低洗脱效率,减少DNA产量。
    9.DNA可以存放在2-8℃,如果要较长时间存放,可以放置在-20℃。

    储存条件:室温,有效期12个月。


    柱式质粒小量提取试剂盒 DNA纯化关键词:小量质粒制备试剂盒,柱式质粒小量提取试剂盒,小量质粒提取试剂盒


    ·粪便基因组DNA提取试剂盒
    编号:ALH170
    英文名称:Fecal genomic DNA Extraction Kit
    规格:50次
    本试剂盒适用于快速提取各种粪便DNA。常规的DNA纯化方式并不能有效地去除粪便中存在的大量抑制因子而导致下游实验的失败,如PCR不能扩增出所需片段。该试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统,能有效去除动物粪便中各种影响下游实验(如PCR)的抑制因子,并能高效地回收粪便中的基因组DNA。动物粪便样品经特殊缓冲液ASL重悬后,70℃处理5分钟裂解细菌;离心去除不溶解的杂质,蛋白酶K消化进一步去除蛋白和杂质;然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

    试剂盒组份(50次):
    缓冲液ASL—————————0.5ml
    杂质清除剂AB———————50ml
    结合液CB—————————20ml
    抑制物去除液IR——————25ml
    漂洗液WB —————————25ml
    洗脱缓冲液EB ———————20ml
    蛋白酶K——————————20mg
    吸附柱AC —————————50个
    收集管(2ml)————————50个

    产品特点:
    1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
    2.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
    3.快速,简捷,单个样品操作一般可在40分钟内完成。
    4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。

    注意事项:
    1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
    2. 开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。
    3. 结合液CB 和抑制物去除液IR 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
    4. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5, pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在-20℃。DNA 如果需要长期保存,可以用TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
    5. PCR 可能被过量的DNA(一般大于1μg)抑制,使用最小用量的洗脱DNA(适当稀释)反而可以得到更好的扩增。一般加入的洗脱DNA 体积不要超过总PCR反应体积的10%。我们建议在PCR反应体系中加入终浓度0.1 μg/μl的BSA(牛血清白蛋白)有助于得到最佳扩增效果。

    储存条件:室温,有效期12个月。


    柱式质粒小量提取试剂盒 DNA纯化关键词:小量质粒制备试剂盒,柱式质粒小量提取试剂盒,小量质粒提取试剂盒

    PY08-076 磷酸盐缓冲液 9ml 20支/盒 用作稀释液
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