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10000
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海再康
- 保存条件:
室温保存
产品包装:试剂盒组成 D1800-50 D1800-100 储存条件
RNase A 1ml 2ml -20℃
蛋白酶K 1ml 2ml -20℃红细胞裂解液 120ml 120ml×2 RT
溶液A 15ml 2 5ml RT溶液B 15ml 25ml RT
漂洗液 15ml 15ml×2 RT洗脱液 15ml 30ml RT琼脂糖
吸附柱 50个 100个 RT收集管 50个 100个 RT 说 明 书 1份 1份 RT
注意事项:
1、本试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。
2、常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制备大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增抑制现象。
3、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DN**段较小且提取量也下降。
4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。
5、绝大多数哺乳动物的全血如人琼脂糖 全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响白细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20ul,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。
6、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul,体积过小会影响回收效率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的 pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。
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文献和实验的影响,所以回收率并非是一成不变的。所以Qiagen以严谨的态度提供多种条件下的详细介绍:使用QIAquick回收之前和回收之后再混合的DNA 片段 (大小已指出) 。对所有尺寸的片段均获得了接近80%的回收率。A 1-5 : 回收之前; P : 回收之后再混合。样品使用 1.5% 琼脂糖凝胶分析(TAE buffer)。B 1-3: 回收之前; P : 回收之后混合。样品于 3.5% 高分辨琼脂糖凝胶上分析( TAE buffer)。M : pTZ-HinfI marker。记得《分子克隆II
,反应时间在1小时,而反应的终止则由EDTA 溶液的加入完成,因为它能鳌合核酸酶活性所必需的金属离子。 2、DNA的琼脂糖电泳 DNA的电泳有琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺电泳,它们是分离、鉴定和纯化DNA片段的标准方法。 DNA的电泳原理与蛋白质的电泳原理基本相同。DNA分子在电场中通过凝胶介质中而泳动,除电荷效应外,凝胶介质还有分子筛效应,与分子大小及构象有关。由于DNA分子或DNA片段的分子量差别,电泳后呈现迁移位置的差异。琼脂糖凝胶电泳所需样品量仅0.5~1ug
做生物实验的人对琼脂和琼脂糖一定都不会陌生。不过要让你说出它们两者的区别,我想不少人都会支支吾吾。反正不一样呗,培养基用的是琼脂粉,电泳用的是琼脂糖。具体有啥学问,听我一一道来。 先来说说琼脂,它的英文名为agar。这个词来源于马来语的agar-agar,意思是胶状物。中国人亦称为洋菜或冻粉。日本人称之为寒天(kanten),因为它在冬天收获。台湾人叫它菜燕,和燕窝的质感差不多。韩国人的叫法是한
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