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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存。
- 规格:
1μg;100μg
pCMV-C-YFP是再康生物自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黄色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个YFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有YFP标签的融合蛋白。利用YFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白表达水平和细胞内定位,也可以利用YFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。YFP与GFP高度相似,可尝试用GFP抗体检测YFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-YFP质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-740 |
| YFP | 741-1460 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1510-1531 |
| SV40 polyAsignal | 1543-1926 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2064-2370 |
| bla promoter | 2395-2519 |
| SV40 promoter | 2539-2877 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2912-3703 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3704-4162 |
| pUC origin | 4291-4958 |
pCMV-C-YFP质粒(5010bp)的图谱如下:
pCMV-C-YFP的多克隆位点的详细图谱如下:
| SmaI PstI | |||||||
| SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII | |||||||
| 651 | GAGCTCCACC | GCGGTGGCGG | CCGCTCTAGC | CCGGGCGGAT | CCAAGCTTCT | ||
| CTCGAGGTGG | CGCCACCGCC | GGCGAGATCG | GGCCCGCCTA | GGTTCGAAGA | |||
| EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI YFP | |||||||
| 701 | GCAGGAATTC | GATATCGTCG | ACAGATCTCT | CGAGTCTAGA | ATGGTGAGCA | ||
| CGTCCTTAAG | CTATAGCAGC | TGTCTAGAGA | GCTCAGATCT | TACCACTCGT | |||
| 751 | AGGGCGAGGA | GCTGTTCACC | GGGGTGGTGC | CCATCCTGGT | CGAGCTGGAC | ||
| TCCCGCTCCT | CGACAAGTGG | CCCCACCACG | GGTAGGACCA | GCTCGACCTG | |||
| 801 | GGCGACGTAA | ACGGCCACAA | GTTCAGCGTG | TCCGGCGAGG | GCGAGGGCGA | ||
| CCGCTGCATT | TGCCGGTGTT | CAAGTCGCAC | AGGCCGCTCC | CGCTCCCGCT | |||
| 851 | TGCCACCTAC | GGCAAGCTGA | CCCTGAAGTT | CATCTGCACC | ACCGGCAAGC | ||
| ACGGTGGATG | CCGTTCGACT | GGGACTTCAA | GTAGACGTGG | TGGCCGTTCG | |||
| 901 | TGCCCGTGCC | CTGGCCCACC | CTCGTGACCA | CCTTCGGCTA | CGGCGTGCAG | ||
| ACGGGCACGG | GACCGGGTGG | GAGCACTGGT | GGAAGCCGAT | GCCGCACGTC | |||
| 951 | TGCTTCGCCC | GCTACCCCGA | CCACATGCGC | CAGCACGACT | TCTTCAAGTC | ||
| ACGAAGCGGG | CGATGGGGCT | GGTGTACGCG | GTCGTGCTGA | AGAAGTTCAG | |||
| 1001 | CGCCATGCCC | GAAGGCTACG | TCCAGGAGCG | CACCATCTTC | TTCAAGGACG | ||
| GCGGTACGGG | CTTCCGATGC | AGGTCCTCGC | GTGGTAGAAG | AAGTTCCTGC | |||
| 1051 | ACGGCAACTA | CAAGACCCGC | GCCGAGGTGA | AGTTCGAGGG | CGACACCCTG | ||
| TGCCGTTGAT | GTTCTGGGCG | CGGCTCCACT | TCAAGCTCCC | GCTGTGGGAC | |||
| 1101 | GTGAACCGCA | TCGAGCTGAA | GGGCATCGAC | TTCAAGGAGG | ACGGCAACAT | ||
| CACTTGGCGT | AGCTCGACTT | CCCGTAGCTG | AAGTTCCTCC | TGCCGTTGTA | |||
| 1151 | CCTGGGGCAC | AAGCTGGAGT | ACAACTACAA | CAGCCACAAC | GTCTATATCA | ||
| GGACCCCGTG | TTCGACCTCA | TGTTGATGTT | GTCGGTGTTG | CAGATATAGT | |||
| 1201 | TGGCCGACAA | GCAGAAGAAC | GGCATCAAGG | TGAACTTCAA | GATCCGCCAC | ||
| ACCGGCTGTT | CGTCTTCTTG | CCGTAGTTCC | ACTTGAAGTT | CTAGGCGGTG | |||
| 1251 | AACATCGAGG | ACGGCAGCGT | GCAGCTCGCC | GACCACTACC | AGCAGAACAC | ||
| TTGTAGCTCC | TGCCGTCGCA | CGTCGAGCGG | CTGGTGATGG | TCGTCTTGTG | |||
| 1301 | CCCCATCGGC | GACGGCCCCG | TGCTGCTGCC | CGACAACCAC | TACCTGAGCT | ||
| GGGGTAGCCG | CTGCCGGGGC | ACGACGACGG | GCTGTTGGTG | ATGGACTCGA | |||
| 1351 | ACCAGTCCGC | CCTGAGCAAA | GACCCCAACG | AGAAGCGCGA | TCACATGGTC | ||
| TGGTCAGGCG | GGACTCGTTT | CTGGGGTTGC | TCTTCGCGCT | AGTGTACCAG | |||
| 1401 | CTGCTGGAGT | TCGTGACCGC | CGCCGGGATC | ACTCTCGGCA | TGGACGAGCT | ||
| GACGACCTCA | AGCACTGGCG | GCGGCCCTAG | TGAGAGCCGT | ACCTGCTCGA | |||
| ApaI | |||||||
| 1451 |
|
GGGCCCGGTA | CCTTAATTAA | TTAAGGTACC | AGGTAAGTGT | ||
|
CCCGGGCCAT | GGAATTAATT | AATTCCATGG | TCCATTCACA | |||
pCMV-C-YFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-YFP)包括:
| AclI | AfeI | AflII | AgeI | AhdI | AscI | AsiSI |
| BaeI | BbsI | BbvCI | BlpI | BmgBI | BsiWI | BsmBI |
| BspEI | BspQI | BssHII | BstEII | BstZ17I | EarI | EcoNI |
| FseI | NruI | PflMI | PmeI | PmlI | PpuMI | PshAI |
| PspXI | SapI | SbfI | ScaI | SgrAI | SpeI | SwaI |
| XcmI | XmnI | |||||
pCMV-C-mCherry中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-mCherry once)包括:
| NdeI | CA`TA,TG | 240 | PspOMI | G`GGCC,C | 1461 | |
| SnaBI | TAC|GTA | 346 | ApaI | G,GGCC`C | 1461 | |
| CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 380 | PvuI | CG,AT`CG | 1541 | |
| NheI | G`CTAG,C | 597 | BclI | T`GATC,A | 1697 | |
| BmtI | G,CTAG`C | 597 | MfeI | C`AATT,G | 1790 | |
| SacI | G,AGCT`C | 651 | HpaI | GTT|AAC | 1803 | |
| Eco53kI | GAG|CTC | 653 | MluI | A`CGCG,T | 1926 | |
| BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 659 | BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 2087 | |
| SacII | CC,GC`GG | 660 | DraIII | CAC,NNN`GTG | 2153 | |
| NotI | GC`GGCC,GC | 668 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2812 | |
| TspMI | C`CCGG,G | 680 | StuI | AGG|CCT | 2861 | |
| XmaI | C`CCGG,G | 680 | ClaI | AT`CG,AT | 2880 | |
| SmaI | CCC|GGG | 682 | BspDI | AT`CG,AT | 2880 | |
| BamHI | G`GATC,C | 687 | KasI | G`GCGC,C | 3039 | |
| HindIII | A`AGCT,T | 693 | NarI | GG`CG,CC | 3040 | |
| PstI | C,TGCA`G | 699 | SfoI | GGC|GCC | 3041 | |
| EcoRI | G`AATT,C | 705 | PluTI | G,GCGC`C | 3039 | |
| EcoRV | GAT|ATC | 713 | MscI | TGG|CCA | 3122 | |
| SalI | G`TCGA,C | 717 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3158 | |
| AccI | GT`MK,AC | 718 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3158 | |
| BglII | A`GATC,T | 723 | BsrDI | GCAATG,NN` | 3271 | |
| XhoI | C`TCGA,G | 729 | RsrII | CG`GWC,CG | 3556 | |
| PaeR7I | C`TCGA,G | 729 | BstBI | TT`CG,AA | 3722 | |
| XbaI | T`CTAG,A | 735 | BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 4029 | |
| BcgI | ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` | 829 | ApaLI | G`TGCA,C | 4644 | |
| BsrGI | T`GTAC,A | 1450 | PciI | A`CATG,T | 4958 |
pCMV-C-YFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-YFP primer (852-873): 5′- GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC -3′
pCMV-C-YFP的全序列信息:D2630 pCMV-C-YFP-seq.txt
pCMV-C-YFP质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-C-YFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| ZK-2630-1μg | pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) | 1μg |
| ZK-2630-100μg | pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) | 100μg |
| — | 说 明 书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经再康生物书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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