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- 再康生物
- ZK-0043272
- 中国
- 2025年11月20日
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大量
- 英文名：
ProtLytic Phosphatase Inhibitor Cocktail
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海再康生物科技有限公司
- 规格：
1ml
磷酸酶抑制剂混合液（Phosphatase Inhibitor Cocktail）是经优化好的多种 磷酸酶抑制剂的混合物组成的，是一种广谱的抑制剂混合物，在抽提和纯化蛋白时能够 有效防止蛋白被内源性的磷酸酶降解。成分主要含有 sodium fluoride，sodium orthovanadate，Sodium Pyrophosphate，β-glycerophosphate，Imidazole 等多种抑制剂， 主要抑制酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、ATP 酶等，用于蛋白纯化，蛋白免疫印迹, 免疫共 沉淀，免疫荧光，免疫组织化学，激酶测定等研究。
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文献和实验最近很多人问毛老师关于磷酸化的问题。比如：要检测的蛋白有磷酸化的，要加磷酸酶抑制剂吗？在做 erk1/2 磷酸化表达实验，提取总蛋白的时候需要加入磷酸酶抑制剂，什么抑制剂比较好？答案是：当然必须一定要加啊！毛老师来给大家简单解释一下。许多生物学过程和通路的调节都伴随着磷酸酯的形成和去除。而蛋白的磷酸化状态的平衡是由蛋白激酶和磷酸酶相互影响达到的。其中一个重要的步骤就是准确的观察一般和特异的磷酸化状态。在细胞裂解的过程中溶酶体释放大量蛋白酶对磷酸化蛋白会产生极大影响，所以需要磷酸酶抑制剂对磷酸
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 注意：在准备做磷酸（酯）酶实验的时候，不加磷酸酯酶抑制剂。 一、工作液配制 配制 100 ml 的 modified RIPA buffe： 1.称取 790 mg 的 Tris-Base，加到 75 ml 去离子水中，加入 900 mg 的 NaCl，搅拌
一、培养的贴壁动物细胞的蛋白质抽提步骤1、从贴壁细胞培养瓶中小心倾去培养液。2、预冷的PBS清洗贴壁的细胞2次，小心倾去PBS。3、配置含抑制剂的蛋白质抽提试剂（1ml抽提试剂中加入5 μl蛋白酶抑制剂混合液，5 μl PMSF和5 μl磷酸酶混合液）。4、细胞瓶中加入预冷的含抑制剂的蛋白质抽提试剂（107个细胞中加入1ml抽提试剂；5×106个细胞中加入0.5ml抽提试剂），轻轻摇动5分钟。5、用一预冷的橡胶和塑料细胞刮将培养瓶壁上贴壁细胞刮下来，转移细胞悬浮液到离心管中，冰浴下摇动15分钟
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