| 出品公司: | ATCC |
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| 细胞名称: | ATCC CCL-240(HL-60),HL-60,人原髓细胞白血病细胞 |
| 种属来源: | 人 |
| 组织来源: | 外周血；早幼粒细胞 |
| 疾病特征: | 急性粒－单核细胞白血病 |
| 细胞形态: | 原粒细胞 |
| 培养基: | IMDM培养基(GIBCO,货号12200036)，80%；FBS，20%。 |
| 产品目录号: | CCL-240 |
| 生长条件: | 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, |
| 传代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 冻存条件: | 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 |
| 支原体检测: | 阴性 |
| 安全等级: | 1 |
| 应用: | 该细胞可以作为转染宿主细胞。 |
| STR: |
D5S818: 12
D13S317: 8,11
D7S820: 11,12
D16S539: 11
vWA: 16
THO1: 7,8
Amelogenin: X
TPOX: 8,11
CSF1PO: 13,14
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| 同工酶: |
AK-1, 1
ES-D, 1
G6PD, B
GLO-I, 1
Me-2, 1
PGM1, 1
PGM3, 1
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| 备注: |
Nucleotide (GenBank) : M62505 Human C5a anaphylatoxin receptor mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : NM_001736 Homo sapiens complement component 5 receptor 1 (C5a ligand) (C5R1), mRNA.
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| 参考文献: |
Gallagher R, et al. Characterization of the continuous, differentiating myeloid cell line (HL-60) from a patient with acute promyelocytic leukemia. Blood 54: 713-733, 1979. PubMed: 288488
Collins SJ, et al. Terminal differentiation of human promyelocytic leukemia cells induced by dimethyl sulfoxide and other polar compounds. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 75: 2458-2462, 1978. PubMed: 276884
Collins SJ, et al. Continuous growth and differentiation of human myeloid leukaemic cells in suspension culture. Nature 270: 347-349, 1977. PubMed: 271272
Aggarwal BB, et al. Human tumor necrosis factor. Production, purification, and characterization. J. Biol. Chem. 260: 2345-2354, 1985. PubMed: 3871770
Nahm MH, et al. Identification of cross-reactive antibodies with low opsonophogocytic activity for Streptoccus pneumoniae. J. Infect. Dis. 176: 698-703, 1997. PubMed: 9291318
Berninghausen O, Leippe M. Necrosis versus apoptosis as the mechanism of target cell death induced by Entamoeba histolytica. Infect. Immun. 65: 3615-3621, 1997. PubMed: 9284127
Aparicio CL, et al. Correction for label leakage in fluorimetric assays of cell adhesion. BioTechniques 23: 1056-1060, 1997. PubMed: 9421636
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人原髓细胞白血病细胞特点和简介
HL-60是一株早幼粒细胞。 外周血白细胞来自一位患有急性粒-单核细胞白血病的36岁白人女性。 HL-60 自发分化，丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放 线 菌 素D和视黄酸可以促进分化。 细胞表现出吞噬活性，并对趋化刺激有响应。致癌基因myc表达阳性。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。
人原髓细胞白血病细胞接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养 基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联 系。
人原髓细胞白血病细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然 后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养 过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶 中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落 ，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中 或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞， 根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻 存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时 以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
人原髓细胞白血病细胞培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述 现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读细胞 说 明 书 ，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、 所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户 自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细 胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴 壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜 培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为 您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培 养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细 胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 再康生物技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系 ，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
