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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海再康生物科技有限公司
- 库存:
88
- 英文名:
H1975-LUC-GFP-PURO细胞
- 运输方式:
常温/干冰运输
- 细胞形态:
液体
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
H1975-LUC-GFP-PURO 细胞
细胞详情 |
|
细胞名称 |
NCI-H1975-LUC-GFP-Puro双标记的人肺腺癌细胞 |
货 号 |
ZK-H119LGP |
组织来源 |
女性,肺;腺癌;非小细胞肺癌 |
细胞类型 |
上皮细胞 |
生长方式 |
贴壁生长 |
描 述 |
该细胞是1988年7月建系,组织捐献者不抽烟。 |
构建信息 |
NCI-H1975-LUC-GFP-Puro细胞为慢病毒感染NCI-H1975细胞得到的稳定表达萤火虫荧光素酶和GFP的细胞系。 |
培养条件 |
1640,10%FBS;空气95%,二氧化碳5%;37℃培养 |
换液频率 |
2-3天 |
传代周期 |
3-5天 |
传代比例 |
1:3-1:6 |
冻存液配方 |
95%完全培养基,5%DMSO |
安全性 |
BSL-1 |
供应限制 |
仅供研究之用。 |
细胞操作详细步骤
--悬浮细胞
1.细胞复苏
1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支15ml离心管,离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
1.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000转离心5分钟。
1.4倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶,补充培养基到5ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
2.细胞传代
第一种方法:
2.1细胞密度达到2×106细胞/ml时,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
第二种方法:
2.2细胞密度达到2×106细胞/ml时,将培养瓶中的细胞悬液分装到新的培养瓶,并补充新鲜培养基,使细胞密度在1-3×105细胞/ml.
3.细胞冻存
将培养瓶中的细胞悬液转移到离心管中,1000转离心5分钟收集细胞,弃上清,加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度1-2×106细胞/ml。将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用,保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异,为了避免细胞不适应,请先按照 说 明 书 推荐的方法和操作步骤培养,待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后,前几代及时冻存一些细胞,并最好是可以多冻存几个批次。
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