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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 英文名:
Recombinant Cisplatin Resistance Associated Overexpressed Protein (CROP)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海再康
- 保存条件:
-20℃
| Organism species | Homo sapiens (Human) |
| Product No. | |
| Source | Prokaryotic expression |
| Host | E.coli |
| Purity | > 95% |
| UOM | 50ug |
| Predicted Molecular Mass | 32.1kDa |
| Concentration | n/a |
| Applications | SDS-PAGE; WB; ELISA; IP. |
| Endotoxin Level | <1.0EU per 1µg (determined by the LAL method) |
| Residues | Met1~Leu247 with two N-terminal Tags, His-tag and T7-tag |
| Formulation | Supplied as lyophilized form in 20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% sarcosyl, 5% trehalose, and preservative. |
MISAAQLLDE LMGRDRNLAP DEKRSNVRWD HESVCKYYLC GFCPAELFTN TRSDLGPCEK IHDENLRKQY EKSSRFMKVG YERDFLRYLQ SLLAEVERRI RRGHARLALS QNQQSSGAAG PTGKNEEKIQ VLTDKIDVLL QQIEELGSEG KVEEAQGMMK LVEQLKEERE LLRSTTSTIE SFAAQEKQME VCEVCGAFLI VGDAQSRVDD HLMGKQHMGY AKIKATVEEL KEKLRKRTEE PDRDERL
Stability Test: The thermal stability is described by the loss rate of the target protein. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37oC for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. (Referring from China Biological Products Standard, which was calculated by the Arrhenius equation.) The loss of this protein is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
Protein bands: 10kDa, 14kDa, 18kDa, 22kDa, 26kDa, 33kDa, 44kDa and 70kDa.
Double intensity bands: The 26kDa, 18kDa, 10kDa bands are at double intensity to make location and size approximation of proteins of interest quick and easy.
Ready-to-use: No need to heat, dilute or add reducing agents before use.
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文献和实验:这个问题比较宽泛,也没有标准的答案,我们只能结合目前的一些经验说一下。我们义翘神州经过十多年的重组蛋白表达,在细胞、载体及培养基等整体表达体系都进行了优化。经过优化的体系,HEK293 瞬转表达重组蛋白体系的细胞密度要高于 CHO 细胞,所以在蛋白表达量方面,HEK293 瞬转表达的重组蛋白要比 CHO 更好一些。但在蛋白的修饰和活性方面,我们目前还没有发现明显的差异。3. 用合成的 300bp 片段基因,蛋白怎么都表达不出来怎么办?解答:首先需要确定,这段合成的基因片段有没有经过密码子优化?是不是
的浓度是否适合诱导,生长状态不好的表达菌,一方面会造成目的蛋白的错误折叠,造成蛋白大小,形态等发生改变,另一方面会因为IPTG的加入,导致菌体的死亡或者降解。低温度诱导有助于蛋白二硫键的正确折叠,但对于高温表达的蛋白不适合低温状态,温度过高容易导致包涵体的形成。2.诱导剂:基因的诱导表达基于乳糖操纵子调节机制,没有乳糖存在的时候,阻碍物基因产生阻碍蛋白,阻碍蛋白和操纵子结合,抑制基因的表达;当有乳糖存在的时候,B-半乳糖苷酶和乳糖作用产生异半乳糖,异半乳糖和阻碍蛋白结合,解除抑制,激活基因,开始表达蛋白
。2、增强了IgG的Fc段结合能力:通过基因的修饰,除去了蛋白中不与抗体Fc段结合的部分,增强了蛋白摩尔的结合能力,也去除了蛋白A中,与血清中杂蛋白的结合。3、避免了葡萄球菌的污染:传统制备蛋白A的方法中需要大量培养葡萄球菌,而葡萄球菌又是一种可以污染环境、人体治病的微生物。在大规模的发酵、提纯过程中葡萄球菌不可避免造成环境的污染。采用现代基因工程的技术,避免葡萄球菌在储存、生产、发酵或纯化中的污染。III、广州精达公司-重组蛋白A纯化柱国外公司重组表达蛋白A的产品,由于垄断利率和进口中间商的操作
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