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一个月
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现货
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上海再康生物科技有限公司
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个
中文名:5×7高速增感屏
英文名:5×7高速增感屏
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分子式:N/A
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文献和实验简单,分离范围广(200 bp~50 kb),实验成本低。下表列举了不同浓度琼脂糖凝胶能分离的 DNA 片段范围。表:不同浓度琼脂糖凝胶分离 DNA 片段的范围琼脂糖凝胶浓度(%)分离 DNA 片段范围(kb)0.3 5-600.6 1-200.7 0.8-100.9 0.5-71.2 0.4-61.5 0.2-32.0 0.1-21. 制备 0.8% 凝胶:一般用于 Southern 杂交的电泳胶取 0.8%。2. 电泳:电泳样品中加入 6× Loading 缓冲液,混匀后上样,留一或两泳道加
SSC , 0.1%SDS 的塑料盒内,将盒盖好,置于水平振荡器上,温和振荡 10 min 。 5. 将膜转移至另一含有 100~200ml 预热至 68 ℃、含 0.1%SDS 的 0.5 × SSC 的塑料盒中。 68 ℃下温和振荡 10min 。 6. 重复步骤 5 ,再洗涤至少 2 次,使 68 ℃下共洗涤 3 次。 7. 在印迹纸上晾干膜,然后让膜于 -70 ℃下在含增感屏的暗盒内对 X 线片( Kodar XAR-5 或相应的胶片)放射自显影 24
l 终止反应,标记的探针可直接使用或采用柱层析分离标记好的探针。 4. 点样膜于杂交前漂洗,放入杂交袋中,加入适量预杂交液 2ml/10cm2 在杂交温度下预杂交 10 ~ 60min ,将适量标记探针加入预杂交液中,杂交 1h ~过夜。 5. 洗膜, 2 × SSPE 和 0.1 % SDS 于杂交温度洗 2 次,最后根据探针的 Tm 值调整洗膜 2 次。 6. - 70 ℃放射自显影,用保鲜膜包好杂交膜,放入暗盒,加增感屏,再放置 X 线片,置低温
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