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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
储存-20℃,干燥、避光、密封
- 保质期:
2年
- 英文名:
2-Chloro-1-isopropyl-1H-imidazole
- 库存:
1000
- 供应商:
四川省维克奇生物科技有限公司
- CAS号:
1053655-72-3
- 规格:
100mg
中文名称:2-氯-1-异丙基-1H-咪唑
英文名称:2-Chloro-1-isopropyl-1H-imidazole
分子式:C6H9N2Cl
分子量:144.6
纯度:≥95%
CAS号:1053655-72-3
沸点:223.8±23.0 °CPress: 760 Torr
酸度系数:4.26±0.31Most Basic Temp: 25 °C
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文献和实验性结合到柱子里,其他的杂蛋白流出。Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以也可以与咪唑结合这时候再用咪唑洗脱,梯度洗脱,咪唑竞争性结合到硫酸镍上,目的蛋白就被洗脱了,这时候收集浸出液,那么里面就是你要的目的蛋白,然后透析掉咪唑就行了。现在的柱子大多是预装柱,也就是不用自己填柱,就是装好镍的傻瓜柱,也不贵,上样,洗脱,基本两个步骤就结束了。剩下的看你怎么处理了。 高亲和Ni-NTA纯化介质(L00250)是把螯合剂(氮川三乙酸或NTA)共价偶联到琼脂 糖介质(4%交联)上,然后再螯合Ni2+制备
mM咪唑)悬浮,100ml用5~10ml缓冲液(约当2~5ml每克菌量),视悬浮后的菌液浓度而定;5、反复冻融法破碎细胞:做到14步时由于时间原因不能立即继续后面的操作,可将菌悬液放于-70℃冰箱中冷冻;也可用反复冻融的方法来破碎细胞,在-70℃冻融,在室温下溶解,反复冻融3~4次;6、加Lysozyme至1mg/ml(1ml加10ul),在冰上孵育30min~1h;7、200~300W超声破碎,2s×30次,停顿2s;若菌种较多可以增加破碎次数。注意超声破碎时间,不可太长,否则温度升高易导致蛋白
值7.5,500mmol/L NaCl,100mmol/L咪唑)洗脱,每管收集1ml组分,共4~10ml。 8) 将抗体组分对PBS透析以去除咪唑和高浓度氯化钠。 9) 用复原缓冲液(50mmol/L磷酸盐缓冲液pH值7.5,500mmol/L NaCl,250mmol/L咪唑)清洗柱子后,用上样缓冲液(50mmol/L磷酸盐缓冲液pH值7.5,500mmol/L NaCl,20mmol/L咪唑)平衡柱子。 4. Fab抗体的特异性鉴定 对于所获
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