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- 2026年02月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
9999
- 英文名：
Clara® Inhibitor-Tolerant Probe 1-Step Mix No-Rox
- 保质期：
2029 年 2 月 12 日
- 保存条件：
-20度冻存
产品概述
Clara® 抑制剂耐受性探针法预混液和一步法预混液是广谱抑制剂耐受性的 4× 预混液，分别用于探针法 qPCR 和一步法 RT-qPCR。即使存在 PCR 抑制剂，使用 Clara® 抑制剂耐受性探针法预混液也能实现尖端的 DNA 和 RNA 检测。这些广谱、抑制剂耐受性的 qPCR 预混液经过专业设计，能够克服来自实验室、环境和临床样本中的各种挑战性抑制剂，确保 DNA 检测结果可靠并简化工作流程。对于希望扩增 RNA 的终端用户，我们推荐 Clara® 抑制剂耐受性探针法一步法预混液。
抑制剂耐受性测试
Clara® 抑制剂耐受性探针法预混液已针对以下物质进行了广泛测试：
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粗唾液
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粗制血液
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实验室化学品
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临床抑制剂
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植物和环境抑制剂
产品特点
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广谱抑制剂耐受性： 有效对抗多种PCR抑制剂。
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4× 浓缩配方： 适合高通量和高度多重检测。
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优异的RNA/DNA检测能力： 对RNA和DNA靶标均有高检测灵敏度。
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低模板定量可靠： 可准确定量低丰度模板。
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抗体介导的热启动技术： 提高反应特异性和灵敏度。
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广泛的仪器兼容性： 兼容所有实时荧光PCR平台——标准和快速循环条件。
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支持超快循环： 逆转录可短至3分钟，PCR变性1秒，退火/延伸3秒。
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一步法配方： 包含修饰的 UltraScript® 逆转录酶和RNase抑制剂，单管操作。
应用领域
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物种丰度定量
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基因分型
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等位基因鉴别
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体外诊断试剂盒开发
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单重及多重RNA/DNA检测
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粗唾液样本qPCR
什么是Clara®抑制剂耐受性探针法预混液？
PCR和qPCR可受多种化学物质抑制，从而影响qPCR工作流程和诊断过程。Clara®抑制剂耐受性探针法预混液是一种4×即用型预混液，包含DNA聚合酶、缓冲液、镁离子、dNTPs以及成功进行探针法qPCR所需的其他组分，均为单管形式。终端用户可将此预混液与引物、探针和模板混合，用于单重或多重检测。该预混液通用性强，兼容所有探针化学（如TaqMan、Scorpions、分子信标等），并兼容所有商业化的实时PCR仪。Clara®抑制剂耐受性探针法预混液专为体外诊断试剂盒开发以及需要高效、可靠qPCR反应的各种研究应用而设计。
图1. 使用Clara®抑制剂耐受性探针法预混液检测DNA靶标。
使用Clara®抑制剂耐受性探针法预混液，在探针法qPCR反应中扩增γ-肌动蛋白的系列稀释液。使用了四种模板稀释度，每个靶标设三个技术重复，反应体系为20 μL。循环条件为：95°C 3分钟；随后95°C 10秒，60°C 20秒，共50个循环。Clara®抑制剂耐受性探针法预混液可成功扩增低至每反应0.25 pg/μL的cDNA靶标。
图2. 在有/无唾液情况下对DNA靶标进行四重检测。
使用Clara®抑制剂耐受性探针法预混液，在多重qPCR检测中扩增四个DNA靶标，比较存在人唾液（紫色）和不存在人唾液（蓝色）的情况。反应体系为20 μL，每个靶标/稀释度设三个技术重复。含唾液的反应中含有5 μL用通用转运培养基1/10稀释的唾液。循环条件为：95°C 3分钟；随后95°C 10秒，60°C 20秒，共50个循环。Clara®抑制剂耐受性探针法预混液即使在存在人唾液的情况下，也能在多重检测设置中成功扩增DNA靶标。
什么是Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液？
Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液是一种4×即用型预混液，包含DNA聚合酶、逆转录酶、RNase抑制剂、缓冲液、镁离子、dNTPs以及成功进行探针法（RT-）qPCR所需的其他组分，均为单管形式。终端用户可将此预混液与引物、探针和模板混合，用于单重或多重检测。该预混液通用性强，兼容所有探针化学，并兼容所有商业化的实时PCR仪。Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液专为体外诊断试剂盒开发而设计，也可用于需要高效、可靠（RT-）qPCR反应的各种研究应用。
图3. 使用Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液进行五重RNA靶标检测。
使用Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液，在多重一步法RT-qPCR反应中扩增五个RNA靶标。每个稀释度设三个技术重复，反应体系为20 μL。循环条件为：47°C 10分钟，95°C 2分钟；随后95°C 10秒，60°C 30秒，共50个循环。Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液在五重一步法RT-qPCR反应设置中，于标准循环条件下显示出高灵敏度和效率。
图4. 在有/无唾液情况下对病毒RNA靶标进行四重检测。
使用Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液，在多重一步法RT-qPCR反应中扩增四个RNA靶标，比较存在人唾液（紫色）和不存在人唾液（蓝色）的情况。每个靶标设四个模板稀释度，每个稀释度三个技术重复，反应体系为20 μL。含唾液的反应中含有5 μL用通用转运培养基1/10稀释的唾液。循环条件为：47°C 10分钟，95°C 2分钟；随后95°C 10秒，60°C 30秒，共50个循环。Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液即使在存在人唾液的情况下，也能在多重检测设置中成功扩增RNA靶标。
图5. Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液与竞品的比较。
在存在人唾液的条件下，使用四种不同的预混液（包括Clara®）对四个RNA靶标进行多重一步法RT-qPCR反应比较。反应条件同上。Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液在存在人唾液的多重检测设置中，其性能匹配或优于三种竞品。
图6. Clara抑制剂耐受性化学在抑制剂存在下提供稳健性能。
使用Clara®抑制剂耐受性探针法一步法预混液，挑战递增浓度的各种临床、植物、环境和实验室化学抑制剂。根据未抑制的对照反应（100%活性）计算各抑制剂浓度存在下的活性百分比。PCR Biosystems的抑制剂耐受性化学在大多数测试抑制剂存在下均能提供稳健的qPCR性能。*纤维素在所用水性反应条件下不溶，以悬浮液形式加入。
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文献和实验充分的准备是实验成功的关键，那么，qPCR 实验需要提前做好哪些了解呢？ 试剂的储存条件 市面上大多数 qPCR 试剂推荐 - 20 ℃ 避光长期储存。 Vazyme 的 ChamQTM 和 AceQ® 两个系列的 qPCR Master Mix，长期储存应置于 - 20 ℃ 避光，解冻后可于 4 ℃ 短暂存放；避免反复冻融。 原始模版稀释倍数 尽量选择 Ct 值落在 15 - 28 范围的稀释倍数作为原始模板稀释度。 反应体系与次数 推荐 20 μl 体系，Vazyme
-PCR试剂盒还会有逆转录酶——这里有个一步法和两步法的区别，一般而言两步法较灵活，一次cDNA反应可以进行多次PCR反应，而一步法就相对简单快速。ABI有个通用型的一步法试剂盒（Universal PCR Master Mix），这个试剂盒其实也就是Core Reagents试剂盒的成份，但是已经预混合起来的，并且在此基础上加入了一些额外的成份帮助完成简单高效的Taqman探针定量PCR反应，反响不错，甚至对于一些“刻薄”的G/C富集的模板也得到了相当不错的结果。 Qiagen的Quantitect
%，避免引物内含有互补序列，3』端尽量不要出现含有连续三个以上的 G 或 C 的片段，真核基因设计引物时最好跨内含子哦。 选择合适 ROX 参照染料 各位同学在选购产品、做实验时，首先要弄清自己实验室的仪器对应哪种 ROX（High 还是 Low）！试剂买回来，样也加好了，最后发现不能用在自家仪器上，内心也一定是很崩溃。诺唯赞的染料法荧光定量专用预混液提供各种 ROX 供选择，如果不想这么麻烦，ChamQTM Universal SYBR® qPCR Master Mix （Q711）那是极好
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