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100
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百欧泰
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10 ml
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文献和实验) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 唾液酸( SA ) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中 人 唾液酸(SA ) 浓度。 试剂盒组成 : 试剂盒组成 48 孔配置
: 1、引物、探针的设计: 探针Tm为68-70℃ , 引物尽量靠近探针,扩增片段 2、反应参数的确定: 一般为:94 ℃,10-20S 60℃,30-60S(Taq酶5′→3′外切核酸酶活性在60℃ 最高) 也可通过温度梯度优化退火温度72 ℃,45 S, 3、优化引物和探针浓度:获得最小Ct值,信号/背景比值的最大值 引物浓度:50-900nM 探针浓度:50-250nM 4、其他与常规PCR相同 (二)优缺点 优点: 对目标序列的高特异性
is cDNA concentration 200 ng/ul too high for qRT-PCR-Rea
primers because I use pre-designed TaqMan Gene Expression assays. AB always recommends 900 nM primers whether it is their assay or your own. Please note these are TaqMan assays and not SYBR green. I think their recommendation for SYBR green is much lower
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