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90天
- 英文名:
pENTER-FLAG-6×His
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pENTER-FLAG-6×His
货号:KM1069975
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞,腺相关病毒
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Kan
真核抗性:Puro
荧光标记:
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文献和实验(Figure 2). Data generated from this assay is currently in submission. Procedure Part I: Detection of Flag-tagged proteins binding 5´ biotin labeled siRNAs in vitro 1.A minimum of ~4.0×106 cells are required/sample and clearly the more cells to begin
一、材料与方法 1. EDTA(无蛋白酶抑制剂)(Roche) 2. 毛地黄皂苷(EMDChemicals) 3. 蛋白酶抑制剂(DMSO,leupeptin,pepstatin)(Sigma) 4. BECKMAN离心管(BECKMAN) 5. ANTI-FlagM2亲和树脂(Sigma) 6. 3×FLAG肽(Sigma) 二、设备
,在翻转摇床上轻柔孵育2.5小时。 (7)400× g 离心1分钟。用移液管去除上清。保存80 μl 上清作为未结合对照。 (8)用1 ml 免疫沉淀缓冲液漂洗吸附柱,重复4次。 3. 洗脱带有FLAG标签的蛋白 用3×FLAG多肽洗脱。此方法洗脱效率极高 (1)准备3×FLAG洗脱缓冲液。加入30 μl 漂洗缓冲液(含0.25%digitonin和2 μg/μl 3×FLAG多肽) (2)向有吸附柱的试管中加入30 μl 3×FLAG洗脱缓冲
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