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- 文献和实验
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- 生长状态:
贴壁生长
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1×10⁶cells
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文献和实验做好准备工作之后,先把旧的培养基倒掉。再用PBS洗两遍,然后加0.05%胰酶/EDTA,剂量根据培养瓶大小定,一般是25cm 2 的瓶子大约0.8-1ml,轻摇10——15秒,使消化液均匀覆盖瓶底即可,再倒掉。置培养箱3-5分钟(看消化效果而定),等大部分细胞呈流沙状滑落时,即加入培养基终止消化,一般以1:5左右的比例传代(视计数结果和看细胞长满的程度而定)。这种方法养比较顽强的细胞很好,既节省步骤,也降低了离心和较长时间消化对细胞带来的损伤,其实大家也可以试试用这种方法养别的细胞。主要做
重大突破!甘波谊团队 Nature 首次报道第三种铁死亡抑制机制,提供抗癌新思路
)使细胞对 GPX4 抑制剂更加敏感;然而,添加尿苷并不影响细胞对 GPX4 抑制剂的敏感性。 图片来源:NatureDHO 和 OA 分别是 DHODH 反应的底物和产物,DHO 和 OA 对铁死亡有着相反的影响,提示 DHODH 可能对于铁死亡有着调节作用。作者发现抑制 DHODH 可诱导 GPX4 低表达的细胞(如 NCI-H226)发生铁死亡;对于 GPX4 高表达的细胞(如 HT-1080),抑制 DHODH 不能显著诱导铁死亡的发生,但能使细胞对铁死亡诱导剂变得更加敏感,而敲除 GPX
应用于基因治疗。 (2) 自下而上的策略 该策略是在细胞内或者细胞外将着丝粒DNA、端粒DNA以及复制原点装配在一起,从而构建HAC。研究者应用这种策略,在HT1080细胞中得到了第一种HAC。他们将>1 Mb的人17号染色体的α卫星DNA、人端粒DNA、人基因组DNA随机片段用脂质体共转染HT1080细胞。经过重组,那些同时含有着丝粒、端粒、复制起点且按照正常染色体结构顺序的重组连接产物以染色体的形式稳定保存下来,而那些不完整或未按照正常顺序连接的产物因其不能稳定
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